【摘 要】
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铁作为多种重要代谢过程的关键营养素,严重缺乏会造成缺铁性贫血,危害身体健康,因此在缺铁时额外摄取补铁剂十分必要。目前,肽铁螯合物被认为是缓解缺铁性贫血的最佳补充剂之一。本研究以燕麦为原料,在采用酶法制备燕麦多肽的基础上,进一步研究肽铁螯合物制备工艺,获得了一种新型燕麦多肽亚铁螯合物(OP-Fe2+),并对该螯合物进行结构表征及性质研究。在此基础上,通过建立缺铁性贫血大鼠（IDA）模型,观察OP-F
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铁作为多种重要代谢过程的关键营养素,严重缺乏会造成缺铁性贫血,危害身体健康,因此在缺铁时额外摄取补铁剂十分必要。目前,肽铁螯合物被认为是缓解缺铁性贫血的最佳补充剂之一。本研究以燕麦为原料,在采用酶法制备燕麦多肽的基础上,进一步研究肽铁螯合物制备工艺,获得了一种新型燕麦多肽亚铁螯合物(OP-Fe2+),并对该螯合物进行结构表征及性质研究。在此基础上,通过建立缺铁性贫血大鼠（IDA）模型,观察OP-Fe2+对IDA大鼠缺铁性贫血的改善效果,并进一步分析了其对IDA大鼠抗氧化能力、肝脏组织损伤修复以及缓解焦虑和抑郁表现等方面的改善作用。研究结果如下:（1）通过碱溶酸沉法从燕麦中提取燕麦蛋白,酶法水解后采用超滤法收集<3 k Da的多肽组分,冷冻干燥获得燕麦多肽。根据单因素和响应面优化实验,确定了制备OP-Fe2+的最佳工艺条件为:p H 5.6,肽铁质量比4.4:1,多肽浓度3%,温度40℃,时间30 min。在此条件下,螯合率达62.6%。（2）采用多种定性和定量实验方法对OP-Fe2+的结构及性质展开研究。硫化钠定性实验结果表明燕麦多肽与亚铁离子螯合充分,且螯合物中不含游离的多肽和亚铁离子;紫外扫描和红外光谱实验结果表明,亚铁离子主要与多肽结构中的氨基和羧基结合;荧光光谱分析发现,燕麦多肽与亚铁离子之间存在相互作用,且螯合过程中燕麦多肽内源性荧光发生猝灭,多肽发生折叠;扫描电镜和原子力显微镜结果表明,燕麦多肽和OP-Fe2+二者的微观形态存在明显差异,与燕麦多肽相比,OP-Fe2+粒径减小,颗粒高度降低;体外抗氧化实验研究发现,相同浓度下,OP-Fe2+抗氧化效果显著高于燕麦多肽。（3）通过建立IDA大鼠模型,研究了OP-Fe2+对缺铁性贫血大鼠的改善效果。结果表明,与模型组（MG）相比,低、中、高剂量OP-Fe2+组（OPFL、OPFM、OPFH）的大鼠体重、脾脏系数、血红蛋白值（Hb）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、总铁结合能力（TIBC）、血清铁（SI）、血清铁蛋白（SF）水平和谷草转氨酶（AST）含量均得到显著性改善（p<0.05）,均可恢复到正常水平;从Hepcidin的m RNA表达水平来看,与MG组相比,OPFM和OPFH组明显升高（p<0.05）至正常水平,表明OPFM、OPFH组比OPFL组对缺铁性贫血大鼠的改善效果更好。另外,其他检测结果表明,OP-Fe2+有助于恢复贫血大鼠的抗氧化能力,减轻缺铁性贫血对机体造成的肝脏损伤,并提高IDA大鼠自主探究行为,降低IDA大鼠的焦虑和抑郁表现。
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