【摘 要】
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慢性粒细胞白血病（Chronic myelogenous leukemia,CML）,是由BCR/ABL融合基因引起的多能造血干细胞恶性肿瘤。BCR/ABL融合基因作为CML的重要分子标志物,检测其表达水平对监测疾病从慢性期到急性期和慢性粒细胞白血病患者在治疗后残留白血病细胞的存在具有重要的临床意义。目前,常规检测融合基因的方法主要有荧光原位杂交、实时定量逆转录PCR、流式细胞术等,但这些方法往往
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慢性粒细胞白血病（Chronic myelogenous leukemia,CML）,是由BCR/ABL融合基因引起的多能造血干细胞恶性肿瘤。BCR/ABL融合基因作为CML的重要分子标志物,检测其表达水平对监测疾病从慢性期到急性期和慢性粒细胞白血病患者在治疗后残留白血病细胞的存在具有重要的临床意义。目前,常规检测融合基因的方法主要有荧光原位杂交、实时定量逆转录PCR、流式细胞术等,但这些方法往往受限制于复杂的技术、昂贵的仪器和较低的灵敏度。因此,发展一种灵敏、快速、简便的BCR/ABL融合基因检测新方法仍是亟待解决的问题。本研究基于有序DNA walker等温信号放大策略结合金纳米粒子功能化的氮化碳纳米复合物（Au@g-C3N4 NHs）,构建了一种用于BCR/ABL融合基因高灵敏检测的ECL生物传感新方法。首先通过三条DNA链（L1,L2和BS）的杂交反应组装了有序的DNA轨道,并将制备的DNA轨道进一步组装到修饰Au@g-C3N4 NHs的电极表面,从而为DNA Walker行走提供了优良的界面轨道。此时,叶酸标记的BS链（FA-BS）与电极表面的Au@g-C3N4 NHs距离较近,因此猝灭其ECL信号。当BCR/ABL融合基因存在时,结合两条用于行走的DNA链（WD1和WD2）形成双足DNA walker,在有序界面轨道上行走,并置换FA-BS使ECL信号恢复,实现基于DNA walker的信号放大。与随机构建的DNA轨道相比,编程调控的有序DNA轨道提供了与DNA walker双足步长匹配的锚点距离,极大降低了动力学能垒和行走过程内中断的风险,从而提高了DNA walker的行走效率。得益于这类DNA walker在信号放大方面表现出的更高效率和能力,所构建的ECL传感器实现了对BCR/ABL融合基因的高灵敏检测,最低检测限低至0.18 f M,动态线性范围为1 f M到100 p M。同时,两条行走DNA链对靶物质的特异识别有效避免了干扰物质对检测的干扰,使得该方法实现了复杂基质环境中对加标样本的特异性检测。综上,所构建的生物传感策略为提高生物传感器的工作效率提供了一种简单的方法,在临床检测和科学研究中具有潜在的应用价值。
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