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目的:探讨糖耐康对2型糖尿病模型db/db小鼠的肠道菌群及TLR4/NF-κBp65通路的影响,为临床治疗2型糖尿病提供基础研究依据与指导。方法:16只雄性db/db小鼠连续两日尾静脉测随机血糖≥11.1mmol/L选入实验组,按血糖及体重随机将其分为模型组(C组)和糖耐康组(TNK组),另设同周龄8只db/m~+小鼠为正常组(N组)。TNK组按3.24g/(kg.d)给药,N组和C组给予等体积的双蒸水,连续给药8周,观察一般情况并每4周测空腹血糖和体重。给药干预8周后,取材后测血清中生化指标TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA、ALT、AST;ELISA法检测血清中空腹胰岛素、LPS水平及肝组织匀浆中炎性因子TNF-a、IL-6和IL-lβ的表达水平;取肝脏和结肠组织石蜡包埋切片,行HE染色并观察肝脏组织的病理改变;采用16S rRNA测序,分析肠道菌群的变化;Western blot法检测肝脏组织中TLR4、NF-κBp65的蛋白表达量;免疫组化法检测结肠组织中ZO-1、Occludin蛋白表达量。结果:(1)在改善IR和糖脂代谢方面:与N组比较,db/db小鼠的体重在各个时间点明显高于N组(P<0.01),且肝重和肝脏指数显著性高于N组(P<0.01),db/db小鼠的空腹血糖、血清胰岛素水平、胰岛素抵抗指数明显升高(P<0.01),其TG、TC、FFA、AST和ALT水平显著性增高(P<0.01);与C组比较,TNK组小鼠体重有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05),肝重和肝脏指数明显下降且具有统计学意义(P<0.01),给药第4、8周空腹血糖水平降低(P<0.05),取材后测血清胰岛素水平和胰岛素抵抗指数下调(p<0.05),TG、TC、FFA、AST和ALT水平明显降低,差异显著且有统计学意义(p<0.01)。(2)形态学检测:与N组比较,病理观察db/db小鼠的肝脏受损;与C组比较,TNK组小鼠肝脏病理表现以轻度至中度脂肪变性为主,肝细胞形态大致正常,肝细胞内脂肪空泡减少,炎性细胞浸润减少。(3)16S rRNA生物信息学分析:与N组比,C组小鼠的肠道群落丰富度和多样性降低。在门水平分析:与N组比,C组小鼠的厚壁菌门的相对丰度增加,拟杆菌门和变形菌门的相对丰度减少;在属水平分析:与N组比,C组unclassified＿f＿＿Lachnospiraceae、Rikenellaceae＿RC9＿gut＿group和Roseburia丰度增加,norank＿f＿＿Bacteroidales＿S24＿7＿group和Lachnospiraceae＿UCG＿006的丰度减少,差异有统计学意义(p<0.05);与C组相比,TNK组小鼠的肠道群落丰富度和多样性增加。在门水平分析:TNK组小鼠的厚壁菌门的相对丰度减少,拟杆菌门和变形菌门的相对丰度增加。在属水平分析:与C组相比,TNK组小鼠的Helicobacter和Prevotellaceae＿UCG＿001的丰度减少,差异有统计学意义(p<0.05)。(4)TLR4/NF-κBp65信号通路的影响:与N组比较,C组小鼠血清中LPS、肝脏组织中TNF-a、IL-6、IL-lβ、TLR4和NF-κBp65表达水平升高,结肠组织中ZO-1和Occludin水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较,TNK组小鼠血清中LPS、肝脏组织中TNF-a、IL-6、IL-lβ、TLR4和NF-κBp65表达水平降低,结肠组织中ZO-1和Occludin蛋白表达水平升高,具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)糖耐康可有效地改善db/db小鼠的糖脂代谢和胰岛素抵抗。(2)糖耐康可增加db/db小鼠肠道菌群的丰富度和多样性,调节肠道菌群的结构并减少了产生LPS的幽门螺杆菌(Helicobacter)。(3)糖耐康对db/db小鼠肠道粘膜损伤有修复作用,上调紧密连接蛋白Occludin及ZO-1的表达,降低血循环LPS水平,通过调节TLR4/NF-κBp65信号通路,减轻炎症反应,改善胰岛素抵抗。