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目的:研究Treg、Th17及其相关因子在老年慢性阻塞性肺疾病中的表达及变化,初步探讨Treg/Th17细胞失衡在老年COPD中的作用。方法:分为动物实验和临床实验两部分。(1)动物实验:通过观察大鼠皮毛颜色,测体重,脏器系数比,观察各个脏器的组织切片,检测肺、肝、心、肾、脑功能及衰老因子Sirtuin-1的表达,确定老年大鼠年龄。随机将雄性SD大鼠分为成年组(6月)和老年组(24月),随机分为对照组、COPD模型组、维甲酸干预组、环孢素A干预组,采用每日熏香烟和气管内滴入脂多糖(LPS)法制作大鼠COPD模型,同时利用维甲酸、环孢素A对其进行干预。测定大鼠肺功能并观察大鼠肺组织病理形态学改变;流式检测Treg细胞、Th17细胞数目;免疫印迹(western blot)检测肺组织中Foxp3、ROR的蛋白表达水平;免疫组化分析肺组织中IL-10的表达水平;ELISA检测血清、肺泡灌洗液IL-10、IL-17的表达(2)临床实验:收集手术切除肺癌患者肺组织标本,COPD患者及健康人的外周血,分为成年对照组、老年对照组、成年COPD组、老年COPD组。免疫印迹(western blot)检测肺组织中Foxp3、ROR的蛋白表达水平;免疫组化分析肺组织中IL-10的表达水平;ELISA检测血清IL-10、IL-17的表达。结果:1.动物实验结果:(1)通过观察大鼠皮毛颜色,测体重,脏器系数比,各个脏器的组织切片,检测肺、肝、心、肾、脑功能及衰老因子Sirtuin-1的表达,确定老年大鼠年龄为24月。(2)大鼠肺功能指标(FEV0.3、FEV0.3/FVC%、PEF)在COPD组较对照组降低(P<0.05),甲酸干预组较COPD组升高(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组下降(P<0.05,老年组较成年组下降(P<0.05)。COPD组大鼠肺部病理改变符合COPD的形态学特征,维甲酸干预组大鼠肺组织病理改变较COPD模型组改善,环孢素A干预组大鼠肺组织病理改变破坏明显,老年组较成年组肺组织病理改变破坏更加明显。(3)Treg细胞数目在COPD组较对照组降低(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组升高(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组下降(P<0.05),老年组较成年组均降低(P<0.05)。Th17细胞数目在COPD组较对照组升高(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组下降(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组升高(P<0.05),老年组较成年组表达均升高(P<0.05)。(4)大鼠肺组织中Foxp3蛋白表达在COPD组较对照组降低(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组升高(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组下降(P<0.05),老年组较成年组均降低(P<0.05)。ROR蛋白表达在COPD组较对照组升高(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组下降(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组升高(P<0.05),老年组较成年组均升高(P<0.05)。(5)大鼠血清IL-10的表达在COPD组较对照组降低(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组升高(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组下降(P<0.05),老年组较成年组均降低(P<0.05)。IL-17的表达在COPD组较对照组升高(P<0.05),维甲酸干预组较COPD组下降(P<0.05),环孢素A干预组较COPD组升高(P<0.05),老年组较成年组均升高(P<0.05)。2.临床实验结果(1)人肺组织中Foxp3蛋白表达在COPD组较对照组降低(P<0.05),老年对照组及COPD组较成年各组均降低(P<0.05)。ROR蛋白表达在COPD组较对照组升高(P<0.05),老年对照组及COPD组较成年各组均升高(P<0.05)。(2)人血清IL-10的表达在COPD组较对照组降低(P<0.05),老年对照组及COPD组较成年各组均降低(P<0.05)。IL-17的表达在COPD组较对照组显著增高(P<0.05),老年对照组及COPD组较成年各组均升高(P<0.05)。老年COPD中IL-10的表达在重度组较轻中度组降低(P<0.05);IL-17的表达在重度组较轻中度组增高(P<0.05)。(3)直线相关分析显示在临床实验中IL-10的表达与FEV1(%)均呈正相关(P<0.05)。IL-17与FEV1(%)呈负相关(P<0.05)。结论:1.24月大鼠为老年大鼠。2.在COPD中Treg、Foxp3、IL-10表达降低,Th17、ROR、IL-17表达升高,存在Treg/Th17表达失衡,而在老年中Treg/Th17失衡的程度程度的进一步加深。3.IL-10的表达与FEV1(%)均呈正相关,IL-17与FEV1(%)呈负相关。