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目的:胰腺癌是目前恶性程度极高、放化疗效果较差、生存率低于10%的实体肿瘤之一,由于其解剖位置隐蔽、症状不明显导致早期诊断困难、手术切除率低、容易发生远处转移,预后极差。FOXO3是Fox O家族成员之一,是一种通过诱导细胞增殖、凋亡、细胞周期进程、细胞存活和DNA损伤相关靶基因的转录来介导多种生理和病理过程的转录因子。FOXO3也参与了肿瘤的发生发展和恶性转化,其表达活性的失调会对促凋亡因子产生异常调控,造成肿瘤细胞的生物学行为发生变化。并且,FOXO3在不同类型肿瘤中会发挥可能截然相反的作用。为了弄清FOXO3与胰腺癌的关系及对胰腺癌细胞产生的作用及相关机制,本研究主要利用数据库的样本数据,结合临床收集到的病例进行验证从而获取FOXO3在胰腺癌的表达情况,并实施相关细胞实验研究不同FOXO3表达水平对胰腺癌细胞生物学行为的影响,为胰腺癌患者的综合治疗提供新的方法和策略。方法:使用GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库获取FOXO3在泛癌中的表达数据,观察其在胰腺癌和正常胰腺组织中的差异性表达,通过Kaplan-Meier Plotter生存分析工具获取不同FOXO3表达的胰腺癌患者的生存分析结果,结合本研究收集的胰腺癌患者的临床信息分析验证FOXO3的表达及对胰腺癌患者预后的影响,并通过免疫荧光实验检测FOXO3在胰腺癌中的亚细胞定位。细胞实验中选取胰腺星状细胞HPSC和ASPC-1、Capan-1、PANC-1、Mia Paca-2四个胰腺癌细胞株作为候选细胞,实施q RT-PCR和Western blot实验检测以上细胞中FOXO3的m RNA和蛋白表达水平,选择表达较低的两个胰腺癌细胞系进行后续实验。构建FOXO3基因序列并插入至p IRES2-EGFP质粒载体,将质粒转染至上述两个细胞系中,观察GFP表达并筛选稳定株后通过q RT-PCR和Western blot检测转染效率。使用G418筛选后的细胞进行克隆形成实验、CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验和细胞周期实验观察过表达FOXO3后胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期的变化,以分析FOXO3对胰腺癌细胞生物学行为的影响。结果:通过数据库信息得知FOXO3在不同癌种中的表达趋势并不一致,并且FOXO3在胰腺癌组织中的表达高于正常组织。FOXO3高表达组在胰腺癌组织中有28(45.9%)例,而在正常胰腺组织中仅有1(7.7%)例。与正常组织相比,FOXO3在胰腺癌患者中的表达显著升高(p<0.001)。FOXO3的表达与胰腺癌患者的肿瘤原发部位(p<0.001)和分化程度均有显著差异(p=0.005),而与肿瘤的临床分期无明显差异(p>0.05)。通过生存分析发现,与肿瘤组织中FOXO3高表达的患者相比,低表达组患者的OS明显缩短(p<0.05)。免疫荧光实验表明FOXO3主要位于胰腺癌细胞的胞核中,少部分散在于胞质内。通过对胰腺癌细胞PANC-1和Mia Paca-2进行质粒转染实验,获得过表达FOXO3组和阴性对照组的胰腺癌细胞。q PCR和western blot检测细胞转染效果后研究胰腺癌细胞的生物学行为发现:克隆形成实验和CCK8实验均显示胰腺癌细胞过表达FOXO3后增殖能力降低,差异有统计学意义(p<0.05)。划痕实验和Transwell实验证实上调FOXO3后胰腺癌细胞的迁移能力和侵袭能力都出现了明显的降低(p<0.05)。细胞周期实验结果提示与阴性对照组细胞相比,胰腺癌细胞FOXO3表达升高后在细胞G0/G1期的比例下降,S期的比例上升,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:FOXO3在胰腺癌中的表达高于正常组织,并且FOXO3与胰腺癌的分化和预后有关,高FOXO3表达可能是预示胰腺癌患者良好分化和预后的因素。在体外实验中,FOXO3高表达能够显著抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且FOXO3在细胞周期中可通过S期阻滞来抑制胰腺癌细胞的增殖活性。