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益生菌是一种通过平衡宿主肠道内微生物菌群,能产生活性物质,从而对宿主施加有益益生作用的微生物,是人畜等动物肠道内极为重要的生理菌。益生菌具有调节肠道菌群平衡、增强机体免疫力、产生生物活性代谢物等生理学益生功能。本试验以纳豆芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌为目标菌株:(1)优化了纳豆芽孢杆菌的培养条件,并制备了纳豆芽孢杆菌菌粉,可有效的保留了纳豆芽孢杆菌的益生作用,这也有利于将纳豆芽孢杆菌的进一步发展为新型的具有潜在抗血栓功能的益生菌产品。真空冷冻干燥纳豆芽孢杆菌的最佳保护剂组合为A1B3C2D3,即:甘油2%,脱脂奶粉15%,明胶2%,海藻糖12%。此保护剂组合制备的纳豆芽孢杆菌菌粉的存活率可保持在77%,这使的具有潜在抗血栓功能的益生菌产品能保持足够有效的活性。(2)对嗜酸乳杆菌、双歧杆菌生长曲线及其真空冷冻干燥保护剂添加量进行了单因素试验及L9(34)正交优化研究,结果表明:嗜酸乳杆菌培养0h到8h左右时处于生长适应期,8h到24h左右处于生长对数期,24h到40h左右时处于生长稳定期,超过40h进入衰亡期;双歧杆菌培养0h到8h左右时处于生长适应期,8h到20h左右处于生长对数期,20h到40h左右时处于生长稳定期,超过40h进入衰亡期。嗜酸乳杆菌的最佳保护剂组合为海藻糖为12%,脱脂乳粉为5%,蔗糖为5%,明胶为2%;双歧杆菌的最佳保护剂组合为明胶为1.5%,脱脂乳粉为15%,海藻糖为10%,蔗糖为5%。(3)对冻干纳豆芽孢杆菌菌粉、冻干嗜酸乳杆菌菌粉、冻干双歧杆菌菌粉的活菌数、粗蛋白含量、总糖含量、酸度等理化性质;冻干纳豆芽孢杆菌菌粉、冻干嗜酸乳杆菌菌粉、冻干双歧杆菌菌粉在人工模拟胃液、肠液、胆汁中及人体胃肠整体环境中耐受性等生化特性;并对其进行了贮藏性能进行了研究,结果表明冻干的纳豆芽孢杆菌粉活菌数为10.9×109cfu/g、水分含量为2.99%、总糖含量为35.69%、粗蛋白含量为18.31%、酸度为0.36%;冻干嗜酸乳杆菌粉活菌数为9.26×109cfu/g、水分含量为3.09%、总糖含量为42.16%、粗蛋白含量为5.17%、酸度为0.83%,冻干双歧杆菌粉活菌数为8.48×109cfu/g、水分含量为2.09%、总糖含量为44.08%、粗蛋白含量为16.05%、酸度为0.87%。冻干的纳豆芽孢杆菌粉、冻干嗜酸乳杆菌粉、冻干双歧杆菌粉在人工模拟胃液处理2h后存活率分别为90.50%、90.75%、87.10%;在人工模拟肠液中处理45min后存活率分别为88.66%、89.53%、84.68%;在人工模拟胆汁中处理30min后的存活率分别为86.85%、87.72%、84.70%;在模拟人体胃肠道整体环境处理后存活率分别为84.45%、84.37%、83.15%。综合经济成本方面考虑,冻干纳豆芽孢杆菌粉、冻干嗜酸乳杆菌粉、冻干双歧杆菌粉置于4℃条件下贮藏比较合适。(4)研究了由冻干纳豆芽孢杆菌菌粉、冻干嗜酸乳杆菌菌粉、冻干双歧杆菌菌粉按1:1:1混合均匀制成的复合益生菌粉喂养小鼠30d,观察小鼠的生长状况,及测定喂养30d后小鼠的血清生化指标及血常规指标,确定复合益生菌粉对小鼠生长性能的影响。结果表明饲喂复合益生菌粉的3组的小鼠的体重都高于未饲喂复合益生菌粉的空白组小鼠的体重。低、中、高剂量组小鼠增重多于空白组小鼠增重,采食量也多于空白组小鼠的,说明饲喂复合益生菌粉可在一定程度上增强小鼠的食欲。中剂量组及高剂量组小鼠的肝、肾、脾湿重及脏器指数值都高于空白组小鼠的。说明饲喂复合益生菌粉可在一定程度上增加小鼠肝、肾、脾的生长。低、中、高剂量组小鼠的淋巴细胞、中性粒子细胞高于空白组小鼠的。