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大鲵是我国二级保护动物,而子二代大鲵已经在我国各地得到了大量的养殖,其皮肤黏液主要用于开发成大鲵糖肽,但其皮肤中所含的透明质酸的研究开发还属空白。本论文研究了从大鲵黏液中提取透明质酸的工艺及其基本性质,并对其安全性毒理学进行了探究,同时考察了大鲵黏液透明质酸面膜配方研制及其体外保湿、抗氧化及稳定性,以期为综合加工利用大鲵皮肤黏液提供基础数据。研究结果如下:以大鲵粘液为原料提取透明质酸,采用了等电点和有机试剂沉淀相结合的方法去除蛋白质。通过单因素实验、正交实验分析酶用量、酶解时间、温度对透明质酸提取量影响的研究,并对提取工艺进行优化。对提取的大鲵粘液HA粗样品经氯仿除蛋白后,通过DE-52以0-1 mol/L NaCl梯度洗脱纯化。利用高效液相色谱仪,根据标准葡聚糖,检测大鲵Ha分子量。利用傅利叶变换红外光谱仪对大鲵黏液HA进行定性测定。实验结果表明,大鲵黏液HA最佳的提取工艺条件为:胰蛋白酶酶用量1.5%,等电点pH 8.0去除杂质蛋白质,酶解时间4 h,酶解温度37℃,透明质酸的提取量为1.7041 mg/g,约为4.85×106 Da。经本工艺分离出的大鲵黏液HA的红外谱图基本与上海阿拉丁生化科技股份有限公司的标准品的红外吸收光谱图基本一致。通过体外清除自由基和还原Fe3+实验检测其抗氧化能力。DPPH自由基清除实验表明,大鲵透明质酸具有清除DPPH自由基作用,当大鲵透明质酸浓度为17 mg/mL时,DPPH自由基清除率达89.16%。大鲵透明质酸对DPPH自由基清除能力的IC50为8.13 mg/mL。对羟基自由基清除能力测试表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其清除羟基自由基能力增加,当大鲵透明质酸浓度为20 mg/mL时,羟基自由基清除率达73.50%。大鲵透明质酸对羟基自由基清除能力的IC50为12.10 mg/mL。ABTS+自由基清除能力测试表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其清除ABTS+自由基能力增加,当大鲵透明质酸浓度为15 mg/mL时,ABTS+自由基清除率达67.73%。大鲵透明质酸对ABTS+自由基清除能力的IC50为7.00mg/mL。还原力测定表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其还原力增加,当大鲵透明质酸浓度为11 mg/mL时,还原力达0.64。因此,大鲵黏液透明质酸具有一定的体外抗氧化活性。依据《化妆品卫生规范》对大鲵粘液HA进行小鼠急性经口毒性试验,大鼠急性经皮试验。小鼠急性经口毒性实验过程中,未观察到小鼠明显中毒症状,连续观察两周,全过程无一例动物发生死亡,对照组也未发现异常。大鲵黏液透明质酸对大鼠急性经皮毒性实验结果表明,大鼠背部涂大鲵粘液HA后,未观察到明显中毒症状,连续观察两周全过程无一例动物发生死亡,对照组也未发现异常。染毒部位皮肤未观察到有刺激表现,实验结束,觅食及呼吸均正常;毛色光滑,皮肤未见水肿、红斑、脱屑等现象。这些结果表明,大鲵粘液HA对人体无毒无害作用。以羧甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙二醇1500为基质,通过添加甘油、Mitilan、香精,研究了添加大鲵黏液HA配制面膜。实验结果表明,添加6%的大鲵黏液HA时,具有较好的保湿效果、稳定性和较强的体外抗氧化作用,能够清除DPPH自由基、羟基自由基、ABTS+自由基。