大鲵体表黏液透明质酸提取及性质研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yanzixu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大鲵是我国二级保护动物,而子二代大鲵已经在我国各地得到了大量的养殖,其皮肤黏液主要用于开发成大鲵糖肽,但其皮肤中所含的透明质酸的研究开发还属空白。本论文研究了从大鲵黏液中提取透明质酸的工艺及其基本性质,并对其安全性毒理学进行了探究,同时考察了大鲵黏液透明质酸面膜配方研制及其体外保湿、抗氧化及稳定性,以期为综合加工利用大鲵皮肤黏液提供基础数据。研究结果如下:以大鲵粘液为原料提取透明质酸,采用了等电点和有机试剂沉淀相结合的方法去除蛋白质。通过单因素实验、正交实验分析酶用量、酶解时间、温度对透明质酸提取量影响的研究,并对提取工艺进行优化。对提取的大鲵粘液HA粗样品经氯仿除蛋白后,通过DE-52以0-1 mol/L NaCl梯度洗脱纯化。利用高效液相色谱仪,根据标准葡聚糖,检测大鲵Ha分子量。利用傅利叶变换红外光谱仪对大鲵黏液HA进行定性测定。实验结果表明,大鲵黏液HA最佳的提取工艺条件为:胰蛋白酶酶用量1.5%,等电点pH 8.0去除杂质蛋白质,酶解时间4 h,酶解温度37℃,透明质酸的提取量为1.7041 mg/g,约为4.85×106 Da。经本工艺分离出的大鲵黏液HA的红外谱图基本与上海阿拉丁生化科技股份有限公司的标准品的红外吸收光谱图基本一致。通过体外清除自由基和还原Fe3+实验检测其抗氧化能力。DPPH自由基清除实验表明,大鲵透明质酸具有清除DPPH自由基作用,当大鲵透明质酸浓度为17 mg/mL时,DPPH自由基清除率达89.16%。大鲵透明质酸对DPPH自由基清除能力的IC50为8.13 mg/mL。对羟基自由基清除能力测试表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其清除羟基自由基能力增加,当大鲵透明质酸浓度为20 mg/mL时,羟基自由基清除率达73.50%。大鲵透明质酸对羟基自由基清除能力的IC50为12.10 mg/mL。ABTS+自由基清除能力测试表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其清除ABTS+自由基能力增加,当大鲵透明质酸浓度为15 mg/mL时,ABTS+自由基清除率达67.73%。大鲵透明质酸对ABTS+自由基清除能力的IC50为7.00mg/mL。还原力测定表明,随着大鲵透明质酸浓度的增加,其还原力增加,当大鲵透明质酸浓度为11 mg/mL时,还原力达0.64。因此,大鲵黏液透明质酸具有一定的体外抗氧化活性。依据《化妆品卫生规范》对大鲵粘液HA进行小鼠急性经口毒性试验,大鼠急性经皮试验。小鼠急性经口毒性实验过程中,未观察到小鼠明显中毒症状,连续观察两周,全过程无一例动物发生死亡,对照组也未发现异常。大鲵黏液透明质酸对大鼠急性经皮毒性实验结果表明,大鼠背部涂大鲵粘液HA后,未观察到明显中毒症状,连续观察两周全过程无一例动物发生死亡,对照组也未发现异常。染毒部位皮肤未观察到有刺激表现,实验结束,觅食及呼吸均正常;毛色光滑,皮肤未见水肿、红斑、脱屑等现象。这些结果表明,大鲵粘液HA对人体无毒无害作用。以羧甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙二醇1500为基质,通过添加甘油、Mitilan、香精,研究了添加大鲵黏液HA配制面膜。实验结果表明,添加6%的大鲵黏液HA时,具有较好的保湿效果、稳定性和较强的体外抗氧化作用,能够清除DPPH自由基、羟基自由基、ABTS+自由基。
其他文献
目的 研究儿童急性白血病染色体畸变所形成的融合基因与临床诊断、治疗和预后的关系。 方法 采用多重巢式RT-PCR方法检测儿童AL的融合基因联合染色体核型分析、免疫表型、
“祝福”系鲁迅笔下极富绍兴地方特色的一项年终祭祖仪式,绍兴民众普遍将其称为“请大菩萨”或者“作福”,每年腊月廿四至除夕之间在住宅中的厅堂展演。“祝福”自有相关史料
净土宗是当代越南群众信仰的主流宗派,根据净土宗的经典文献,以及世俗民众的心理创新了当代净土法门的弘法度生,启发了普及性。由此可以说,净土法门是巧合各种修习的方式,并
在过去几十年中,煤粉燃烧技术的发展主要基于电厂锅炉运行所积累的经验以及一些小规模试验装置所测得的数据,这些经验和数据有极大的局限性。随着计算机技术的不断发展,燃烧
证券化的债权通过债权与证券的有机结合,有效地促进了债权的流通,证券债权的流通规则已经相对比较完善。而记名债权的让与虽然有很长的历史,但相关的制度和规则却还没有发展
目的:探索低强度华法林抗凝治疗对东亚地区非瓣膜性心房颤动(房颤)患者的有效性与安全性。方法:检索Cochrane、Pubmed、Embase和CBM数据库,收集东亚地区非瓣膜性房颤患者使用
岩土工程实录即岩土工程典型案例的价值主要在于三方面:一是成功的典范,失败的警示;二是一比一的科学实验,因计算不可能精确,唯有原型实测才能定量;三是新概念、新方法的源泉
屯堡文化是贵州独特的汉族亚文化,汪公信仰屯堡人非常重要的地方信仰。作为地方神的汪公,其从人到神,从“土贼”到“忠烈汪王”的历史过程,清晰地显示了这一信仰的国家建构,
日本是一个神社多,寺庙多,宗教派别多而复杂的国家,从而在日本形成了一种特殊的社会现象。因此日本素有“宗教百科”之称。特别是二战后,随着日本经济的高速发展,日本新宗教
本文测定了温度280K以上C60在一些有机溶剂中的溶解度与温度的依赖关系,发现280K以上C60在正己烷,甲苯,二甲苯中溶解度随温度上升而减小,表现出放热的溶解过程,与此相反,在环己烷中C60的溶解度却有所