新疆灰枣叶片中黄酮类化合物的分离鉴定及抗氧化活性

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枣叶是枣树的一部分,常作为无用部分被弃之,本文旨在充分利用生物资源,提高枣叶的利用率,测定了不同品种枣叶在整个生长周期内其抗衰老活性物质含量的动态变化,比较了不同品种枣叶总黄酮、总酚含量的差异性,并对其抗氧化活性进行测定;采用柱色谱法和液相色谱法对灰枣叶活性成分进行了提取、分离纯化和结构鉴定;建立了枣叶的HPLC指纹图谱;并通过体内外抗氧化实验研究了灰枣叶总黄酮的抗氧化活性。研究结果如下:1、骏枣叶、灰枣叶和酸枣叶总黄酮、总酚含量的动态变化过程为一个生长周期内从高到底呈现波动变化趋势,总黄酮开花期含量最高,骏枣叶、灰枣叶总酚含量均在果实成熟期达到最高;果实成熟期枣叶抗氧化能力较弱;枣叶中六种黄酮成分中芦丁含量最大,达到13.37±0.61 mg/g,其次是橙皮苷、野黄岑苷、柚皮苷、山奈酚、槲皮素。2、45个品种枣叶的总黄酮、总酚含量存在差异,黄酮含量最高最低的分别是槟榔枣41.41±2.81 mg/g、三变色枣41.41±2.81 mg/g;总酚含量最高最低分别是中枣3号214.19±3.83mg/g,最低的是赞2枣叶68.14±0.63 mg/g;抗氧化能力较强的是馍湖枣,最弱的是三变色枣;经聚类分析,45个枣叶品种分为五类,第一类聚集了12种枣叶,第二类聚集了6种枣叶,第三类聚集了17种枣叶,第四类聚集了8种枣叶,第五类聚集了2种枣叶。3、从灰枣叶乙醇提取物分离鉴定出7个化合物,分别是槲皮素(1)、芦丁(2)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(3)、山奈酚(4)、异槲皮苷(5)、紫云英苷(6)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(7),(1)6为黄酮类化合物,(7)为香豆素类化合物。4、采用高效液相色谱建立了29个不同品种枣叶的指纹图谱,标定了14个共有峰,共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD值均小于5%,经中药指纹图谱软件分析,29种枣叶可分为二个等级。5、灰枣叶70%乙醇提取物具有一定的抗氧化活性,人工胃液对枣叶提取物处理后,抗氧化活性有显著性提高,人工肠液对枣叶提取物处理后,抗氧化活性有一定的提高;通过持续对昆明小鼠经皮下注射D-半乳糖的方式建立衰老模型,结果表明灰枣叶黄酮能够增加衰老小鼠的体重、衰老小鼠的肝系数和心系数,阳性对照物和不同剂量的灰枣叶总黄酮在肝、心脏、血清中能起到不同的抗氧化和延缓衰老作用,可以增强机体内SOD活力,减少过氧化物等对生物体有害物质的累积,改善小鼠衰老引起的心脏、肝脏、肾脏的病理学变化,提高小鼠各个方面的生理机能。
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