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前言脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA),是较常见的常染色体隐性遗传病。本病由于脊髓前角运动神经元变性导致进行性、对称性肌萎缩和肌张力减低。其发病率为1:5000～1:10000,携带者的发生率为1:35～1:50,居致死性常染色体隐性遗传病的第2位,仅次于囊性纤维变。SMA至今无有效的治疗方法,患者生活质量低下,给社会和家庭带来沉重的负担,所以对该病进行基因诊断及产前基因诊断具有非常重要的意义。1990年Brzustowicz等将SMA基因定位于5q11.2-13.3,通过进一步研究,在这一区域先后确定了4个与SMA有关的基因,其中运动神经元生存基因(survival motor neuron,SMN)为SMA的主要致病基因。SMN基因有两个拷贝,其中端粒侧SMN基因是SMA的决定基因。本研究主要通过对SMN基因的研究来对SMA进行基因诊断。材料与方法一、研究对象:(一)正常对照及标准对照:30名无遗传病家族史的健康成年人与2份SMN基因拷贝数确定的正常人DNA标准品(由福建医科大学馈赠)。(二)SMA患者及其父母:26名由中国医科大学第二附属医院临床诊断的患者,为该院2005年7月至2008年3月门诊及住院病人。全部病例的临床表现均符合临床诊断标准及分型。52名SMA患者的父母。(三)产前基因诊断:既往生产过SMA患儿(经临床及基因诊断确诊为SMA)的孕妇20名,孕16-20周,取其羊水。二、实验方法:(一)应用PCR-RFLP技术对运动神经元生存基因(SMN)第7外显子进行缺失检测。(二)采用多重PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术对SMN1、SMN2基因的拷贝数进行定量研究。结果1.应用PCR-RFLP技术从26名SMA患者中检测出25名为SMN1基因7号外显子缺失。2.应用PCR-RFLP技术从20例羊水标本中检测出12例为SMN1基因7号外显子缺失。3.应用多重PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术从随机选取的30名正常人中检测出1名携带者,15名SMA患者检测结果均为患者,26名疑似携带者(患者的父母)检测结果均为携带者。结论1、应用PCR-RFLP技术可对95%以上的SMA患者进行准确、快速的基因诊断及产前基因诊断。2、我们应用多重PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术对正常人群及SMA家系成员中进行了基因携带者的筛查,检测结果稳定、准确。