【摘 要】
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目的探讨七氟烷对心肌的保护作用是否与HIF2α-AREG通路有关。方法健康雄性SD大鼠45只,约10～12周龄,随机分为5组,经过不同处理后,结扎左冠脉前降支（LAD）,建立心肌缺血再灌注损伤模型,即结扎LAD 40 min,复灌开始时给予2.4%（1MAC）的七氟烷,持续15 min,关闭七氟烷,继续复灌105min。分组:Sham组:假手术组,分离出LAD,在LAD下方只穿线,不接扎;I/R组
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目的探讨七氟烷对心肌的保护作用是否与HIF2α-AREG通路有关。方法健康雄性SD大鼠45只,约10～12周龄,随机分为5组,经过不同处理后,结扎左冠脉前降支（LAD）,建立心肌缺血再灌注损伤模型,即结扎LAD 40 min,复灌开始时给予2.4%（1MAC）的七氟烷,持续15 min,关闭七氟烷,继续复灌105min。分组:Sham组:假手术组,分离出LAD,在LAD下方只穿线,不接扎;I/R组:缺血再灌注损伤组;Sevo组:缺血再灌注损伤+七氟烷后处理组;HIF2α组:缺血再灌注损伤+七氟烷后处理+HIF2α阻滞剂组;AREG组:缺血再灌注损伤+七氟烷后处理+HIF2α阻滞剂+AREG蛋白组。分别比较各组内缺血15min后与缺血前及各组间再灌注2h末平均动脉压的变化,比较各组间心肌梗死部分占左心室比值及Bax、Bcl-2和AREG的蛋白表达情况,以探究七氟烷对心肌的保护作用及此保护作用是否与HIF2α-AREG通路有关。结果1.各组大鼠血流动力学变化:时间、分组、时间与分组交互作用对大鼠心率无明显影响（P>0.05）,对大鼠平均动脉压有明显影响(F时间=101.41,F组间=10.23,F交互=6.93,P<0.05)。各组缺血前心率及平均动脉压没有明显统计学差异（P>0.05）。除Sham组外,其余各组大鼠不同时间段平均动脉压差异显著（F=16.07～34.08,P<0.05）,其中各组大鼠缺血15 min和再灌注2 h末与缺血前平均动脉压相比均有不同程度下降（P<0.05）,Sevo组和AREG组再灌注2 h末平均动脉压较组内缺血15min明显上升（P<0.05）。再灌注2 h末,与I/R组相比,Sevo组和AREG组平均动脉压均明显上升（F=13.62,P<0.05）,而HIF2α组与I/R组比较无明显差异（P>0.05）。2.各组大鼠心肌梗死部分占左心室比值:各组大鼠左心室总重量均无明显差异,但各组心肌梗死面积差异显著（F=193.26,P<0.05）。I/R组大鼠心肌梗死部分占左心室比值与Sevo组和AREG组相比明显增加且差别有统计学意义（t=20.01,P<0.05）,说明七氟烷和AREG能够减轻心肌缺血再灌注损伤,减少心肌梗死面积;Sevo组大鼠心肌梗死部分占左心室比值与HIF2α组相比明显降低且差异显著（t=14.24,P<0.05）;而HIF2α组大鼠心肌梗死部分占左心室比值较AREG组降低,差别有统计学意义（t=15.17,P<0.05）。3.各组大鼠心肌组织中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平:与I/R组相比,Sevo组大鼠心肌组织Bax/Bcl-2比值降低且差异显著（t=5.04,P<0.05）证明了七氟烷具有抗细胞凋亡、保护心肌的作用;与Sevo组相比,HIF2α组大鼠心肌组织Bax/Bcl-2比值上调、AREG组大鼠比值下降,（t=6.79、5.47,P<0.05）,说明了HIF2α阻滞剂对细胞凋亡的正向调控,而AREG则可以抑制细胞凋亡。4.各组大鼠心肌组织中AREG的蛋白表达水平:HIF2α组AREG蛋白相对表达量较Sevo组降低（t=9.27,P<0.05）,AREG组大鼠心肌组织AREG蛋白相对表达量较HIF2α组升高（t=5.65,P<0.05）,暗示了HIF2α是AREG的上游通路。5.各组光镜下心肌细胞形态对比:与I/R组相比,Sevo组光镜下心肌细胞的结构更加完整;与Sevo组相比,HIF2α组光镜下心肌细胞凌乱,核固缩增多,中性粒细胞聚集;与HIF2α组相比,AREG组光镜下心肌细胞较前整齐,中性粒细胞少有聚集。结论七氟烷后处理能够减轻心肌缺血再灌注损伤;HIF2α抑制剂可以抵消七氟烷的心肌保护作用,使心肌损伤加剧,而重组AREG蛋白则可以在HIF2α抑制剂抵消了七氟烷心肌保护作用的基础上改善心功能、增强对血流动力学的保护,且HIF2α-AREG通路参与了七氟烷的心肌保护作用。
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