论文部分内容阅读
羊泰勒虫不同地理分布的虫株在致病力上有很大差异，但不同虫株在蛋白多肽及抗原特性方面是否存在差异，尚不得而知，为此本试验利用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和免疫印迹（Western blotting）方法对羊泰勒虫甘南株（甘肃省）、隆德株（宁夏回族自治区）、张家川株（甘肃省）和麻当株（甘肃省）虫体蛋白进行了分析。SDS—PAGE结果显示，羊泰勒虫甘南株出现了16条带，粗带有102、71、41、33、29、 14kD；隆德株出现了12条带，粗带有102、71、41、31、29、14kD；张家川株出现了14条带，粗带有102、38、33、22、17、16、14kD；麻当株出现了12条带，粗带有102、38、37、27、17、16、14kD。4个虫株蛋白多肽在数量、含量和分子量上存在差异。对4个虫株的电泳谱进行了比较，发现羊泰勒虫甘南株与隆德株的亲源关系较近，与张家川株的亲源关系次之；张家川株与麻当株的亲源关系也比较近。4个虫株的免疫血清分别与4株虫体蛋白进行了免疫印迹试验，结果表明4株虫体的免疫血清与甘南株和张家川株在38kD处有共同反应。免疫印迹试验还发现了隆德株虫体在38kD的多肽和麻当株虫体在35kD的多肽。 自感染红细胞内纯化的羊泰勒虫裂殖子，经冻融、超声裂解后，其可溶性抗原过SephadexG-200，收集蛋白峰，以此作为包被抗原，用常规方法建立了羊泰勒虫病的间接ELISA诊断方法。特异性试验和敏感性试验证明此法特异性高、重复性好。对46份阳性血清和48份阴性血清用ELISA检测，结果阳性检出率为100％，阴性符合率为98.0％。用此方法对人工感染羊和野外感染羊的抗体消长进行检测，结果显示，人工感染羊于感染后第5d即可检出抗体，30～40d达到高峰，抗体液度为1∶3200，然后下降，并维持在1∶400～1∶800之间；野外自然感染羊的抗体水平出现了2个峰值，第1峰在3～7月份之间，第2峰在9～10月份之间。对甘肃省甘南藏族自治州玛曲县、甘南藏族自治州临洮县、张家川回族自治县和天祝藏族自治县的血清进行了检测，其阳性率分别为5.7％、93.8％、82.5％和80.0％，与现可查流行病学调查基本一致。