杜仲雄花提取物抗氧化和抗菌活性评价

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本文以杜仲雄花为材料,利用溶剂分级萃取法提取杜仲雄花各极性溶剂相,利用水提醇沉法提取多糖,经过响应面法优化提取工艺,测定了杜仲雄花多糖抗氧化活性;在测定各相总酚含量的基础上,选用DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、还原力和抗脂质过氧化活性4种指标评价杜仲雄花各萃取(余)相的抗氧化活性,并与抗氧化剂BHT和VC进行比较;以苏云金杆菌、蜡状芽孢杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、产气杆菌、黑曲霉、米曲霉、根霉和啤酒酵母等细菌和真菌为供试菌,对雄花乙醇提取物的石油醚萃取相、乙酸乙酯萃取相、正丁醇萃取相和水相(萃余相)进行抑菌活性分析与评价。取得了以下主要结论:1.杜仲雄花中含有大量的酚类化合物,其中乙酸乙酯相(393.47mg·g-1)和正丁醇相(287.33mg·g-1)中的总酚含量显著高于石油醚相(105.42mg·g-1)和水相(114.74mg·g-1),对DPPH自由基的清除率分别为91.55%和80.32%,接近于BHT和VC;正丁醇相对羟自由基清除率较高(80.47%);乙酸乙酯相的还原力高于BHT和VC;乙酸乙酯相、正丁醇相和水相的抗脂质过氧化活性显著高于VC。杜仲雄花提取物的还原力、DPPH自由基清除率和抗脂质过氧化活性与其总酚含量呈显著的正相关(R2>0.9)、与萃取(余)相的质量浓度呈明显的量效关系,这说明杜仲雄花具有较强的抗氧化活性,可作为进一步食品添加剂的防腐剂。2.杜仲雄花各萃取相均对枯草芽孢杆菌有较强的抑制作用,强于环丙沙星。石油醚相、乙酸乙酯相具有较好的抑制细菌活性。除水相外,杜仲雄花各提取物对供试真菌也具有一定的抑菌活性。石油醚相的MIC范围在0.1512.5mg/mL,MBC范围在0.1525mg/mL;乙酸乙酯相的MIC范围在0.373.25mg/mL,MBC范围在0.3712.50mg/mL。以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为供试菌,研究了杜仲雄花各提取物抑菌活性的稳定性。结果表明,杜仲雄花各提取物(除水相外)的抑菌活性在pH57的溶液中对温度紫外光的稳定性好,可以作为一种保健食品(饮品)进一步开发利用。3.以提取温度、提取时间和液料比作为影响杜仲雄花多糖提取得率的三个因素,利用中心组合(Box-Behnken)试验设计原理,在单因素试验基础上,采用三因素三水平响应面分析法明确了杜仲雄花多糖的提取工艺,并分析了杜仲雄花多糖的抗氧化活性。杜仲雄花多糖提取的最佳工艺条件为以水作为提取溶剂,在81℃下以15倍的液料比(V/W)提取4.5h,多糖的提取得率可达到3.47%,接近于预测的理论值(相对误差为3.2%)。杜仲雄花多糖具有较好的清除DPPH·和OH·活性,并具有较高的还原力。
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