本论文重点研究了蚓激酶基因在毕赤酵母中的表达，并对工程菌发酵条件进行了优化。主要研究结果如下： 以赤子爱胜蚓（Eisenia fetida）的总RNA为模板，通过RT-PCR方法获得含自身信号肽的蚓激酶基因F238。 构建了克隆载体pUCm-T-F238，并对F238基因进行测序（GenBank登录号为：DQ202401）。综合利用生物学软件、数据库对测得的蚓激酶核酸序列、编码的氨基酸序列及蛋白质的理化性质和结构进行分析预测。结果表明，蚓激酶基因全长为738bp，编码含7个氨基酸残基的信号肽序列和238个氨基酸残基的成熟肽序列。与相似性最高的序列F-Ⅲ-2比存在2个碱基的差异，导致2个氨基酸的不同。结构预测表明，F238具有丝氨酸活性中心，属丝氨酸蛋白酶超家族胰蛋白酶类。 以pUCm-T-F238为模板，通过PCR方法得到去信号肽的蚓激酶基因F238-m，构建了毕赤酵母表达载体pPIC9-F238-m，并将其线性化后用电穿孔法转入酵母宿主菌GS115中，经甲醇诱导后，通过SDS-PAGE筛选出高效表达蚓激酶的工程菌株，表达产物的相对分子质量为2.8×10~4。 用纤维蛋白平板法对发酵液中蚓激酶的纤溶活性进行检测，研究了工程菌的最优发酵条件为：种龄20h，初始pH6.5，温度29℃，装液量20mL／250mL三角瓶，甲醇浓度0.25％，诱导时间84h，最终酶活达到189U／mL。