紫色紫孢菌(Purpureocillium lavendulum)是重要的线虫生防真菌。为了研究紫色紫孢菌的产孢调控机理,本研究以模式真菌构巢曲霉为参考,从紫色紫孢菌基因组中找到了构巢曲霉产孢核心调控基因的同源基因。首先,我们通过同源重组的方法,PlKu80敲除菌株为出发菌株,进行了PlAbaA,PlWetA,PlFadA和PlPkaA基因的敲除和PlWetA基因的回补。之后通过对敲除株和回补株的产孢量、产孢结构和孢子萌发能力的检测来阐明该基因调控的具体功能,并对以上表型有变化的菌株进行进一步的表型检测以阐明这些基因的生物学功能。本研究的结果为深入阐明紫色紫孢菌分生孢子产生的调控机制奠定了基础。主要研究结果:1紫色紫孢菌分生孢子的产生受到PlAbaA,PlFadA和PlPkaA基因的调控对获得的突变株和PlKu80菌株的菌落形态、产孢结构、产孢能力、萌发速率及抗逆性进行比较分析。结果显示,ΔPlFadA和ΔPlPkaA的产孢量高于PlKu80敲除株,但在产孢结构上的差异不明显。ΔPlAbaA突变菌株不产孢,有产孢结构,但是不完整,在瓶梗发育阶段缺陷,菌落呈现紧凑白色状。plwetA敲除株有正常的产孢结构。通过透射电镜观察发现ΔplwetA突变体的分生孢子有缺陷。分生孢子的萌发率总体慢于PlKu80菌株,对盐、温度和去污剂等外界环境压力也极为敏感。2PlWetA基因影响紫色紫孢菌分生孢子中海藻糖含量的合成通过对菌丝和孢子中海藻糖含量的测定,发现菌丝中的海藻糖含量无明显差异。而在分生孢子中,ΔPlWetA突变菌株的海藻糖含量明显低于ΔPlKu80菌株和PlWetA回补菌株。通过Northernblot验证发现,在营养菌丝中Tps1,Tps2和Tps3基因mRNA的表达水平变化不大,而在分生孢子产生阶段,Tps1,Tps2和Tps3三个基因在ΔPlKu80菌株中的表达量低,但均高于ΔPlWetA突变菌株。3PlWetA,PlBrlA,PlAbaA基因影响次级代谢产物白灰制菌素的产生将和产孢相关的基因的突变株ΔPlBrlA,ΔPlAbaA和ΔPlWetA及参考株PlKu80敲除菌株进行HPLC检测,发现ΔPlWetA突变株及参考株ΔPlKu80菌株中有对应累积的白灰制菌素特有峰。相比之下,突变株ΔPlBrlA和ΔPlAbaA中没有对应的累积峰形成,且其整体上的峰位都有所减少或降低。本论文的主要创新点:首次对参与紫色紫孢菌产孢过程中的几个核心调控基因进行研究,为该真菌的产孢调控及利用该菌进行线虫的生物防治提供理论基础。