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目的:建立外翻肠囊法模型研究五味清浊散被肠囊吸收的成分;采用血清药物化学方法考察五味清浊散血中的移行成分;研究五味清浊散含药肠吸收液及含药血清对于体外油酸诱导的HepG2细胞内脂肪累积的作用。方法:采用外翻肠囊法制备五味清浊散(Wu Wei Qing Zhuo San,WWQZS)含药肠吸收液,使用UPLC-MS分析技术检测被肠囊吸收的WWQZS成分;采用油酸(oleic acid,OA)诱导HepG2细胞建立体外的HepG2细胞脂肪累积模型;分别以噻唑蓝(MTT值)、油红O染色情况、TG含量变化为指标,评价不同浓度的五味清浊散肠吸收液对油酸诱导HepG2细胞脂肪累积的干预作用。利用UPLC-MS分析技术,检测血中移行成分;通过噻唑蓝(MTT值)实验检测不同浓度油酸或WWQZS含药血清对HepG2细胞活力的影响,采用油红O染色与甘油三酯(TG值)含量测定考察WWQZS含药血清对于体外油酸诱导的HepG2细胞内脂质累积的作用结果:在UPLC-MS的检测下采用Compound Discoverer 3.0软件推测与已知文献多级碎片离子解析,在正负离子下,比对空白肠吸收液样品,最终指认了 6个化合物。分别为胡椒碱、荜茇宁、没食子酸、石榴皮鞣素、羟基红花黄色素A、红花素5-葡萄糖苷。不同浓度的含药肠吸收液干预模型细胞后进行了油红O染色,结果与空白对照组比较,模型组的细胞膜周围出现大量的脂肪累积,大面积的红色脂滴包在细胞膜周围,不同浓度药物干预后,随着药物浓度的增高,脂质累积明显减少,且脂滴变小。TG含量测定结果为不同浓度肠吸收液对HepG2细胞内的TG含量呈剂量依赖性的下降,与模型组相比有极显著性差异。采用Xcalibur 2.2软件推测与已知文献多级碎片信息比对,与空白血清样品对比,在正离子下最终指认了 1个化合物-胡椒碱。不同浓度含药血清干预模型细胞后的油红O染色结果为对照组中的HepG2细胞均呈卵型生长,边缘清晰,胞浆丰富,细胞边缘未见红色脂滴沉积,模型组的细胞可见明显的红色脂滴环绕于细胞核周围,表明细胞模型建立成功,通过光学显微镜进一步观察,随着五味清浊散含药血清浓度的增加,细胞内的红色脂滴逐渐变少,且颜色变浅。适宜浓度的含药血清干预油酸诱导的HepG2细胞后,TG含量与空白对照组比较,模型组细胞甘油三酯(TG)含量极显著性增多(P<0.01),表明采用1mmol/l的油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积模型建立成功,与模型组比较,2.5%-40%浓度范围内的五味清浊散含药血清降低TG含量的作用具有极显著性差异(P<0.01)。结论:通过UPLC-MS检测后,五味清浊散含药肠吸收液中被肠囊吸收的成分为胡椒碱、荜茇宁、没食子酸、石榴皮鞣素、羟基红花黄色素A、红花素5-葡萄糖苷。含药血清中血清移行成分只有胡椒碱,这些成分可能为五味清浊散产生药效的物质基础。药效研究中,以TG和油红O为指标,不同浓度的五味清浊散含药肠吸收液及含药血清均可有效降低HepG2细胞内脂滴的含量和TG的含量,有一定的降脂效果。为该药进一步开发利用提供实验数据。