【摘 要】
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从保藏的20株黑曲霉菌种中,经过初筛,有两株有产生β-1,3-葡聚糖酶的能力.对其中产酶较高的一株,使用紫外线、离子束进行诱变,筛选出产酶能力较强的突变菌株A013.经过正交试
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从保藏的20株黑曲霉菌种中,经过初筛,有两株有产生β-1,3-葡聚糖酶的能力.对其中产酶较高的一株,使用紫外线、离子束进行诱变,筛选出产酶能力较强的突变菌株A013.经过正交试验,选择最适培养基组分为:0.1﹪葡聚糖量、0.15﹪NH<,4>Cl、0.2﹪KH<,2>PO<,4>、0.1﹪MgSO<,4>、7H<,2>O、0.01酵母膏,0.10﹪吐温80、pH6.5-7.最适培养条件 为:接种量1×10<6>个/毫升,菌种种龄4日,30℃,120转/分,培养时间96小时.在最适 产酶条件下黑曲霉A013产酶能力为3.23U/ml.精酶液经硫酸铵盐析,透析袋透析脱盐,SephadexG-100柱层析,酶被纯化了12.5倍,经SDS-PAGE鉴定为一条谱带.酶性质研究表明,该 酶属于外切型的水解酶.最适作用pH5.5,最适作用温度50℃,在20-50℃,pH5-7下稳定. 该酶的表观米氏常数为3.03mg/ml.Zn<2+>,对酶有一定的激活作用,而Pb<2+>,Hg<2+>,对酶有强烈的抑制作用.酶对酵母自溶有一定的促进作用,每克酵母干重加酶1.3U,即可使面包酵母和啤酒酵母自溶液中游离氨基氮含量分别提高0.060克/100毫升,0.076克/100毫升;蛋白质得率分别提高9.6﹪、13.3﹪.
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