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实验旨在探究反10顺12共轭亚油酸(t10c12CLA)在猪卵母细胞体外成熟、玻璃化冷冻保存及孤雌激活胚胎发育过程中的生理作用。首先,将不同浓度的t10c12CLA添加至猪卵母细胞体外成熟体系中。培养结果表明：添加50μmol/Ltl0c12CLA可显著提高卵母细胞体外成熟效率,与对照组相比,其孤雌激活后的卵裂率(89.5%±1.2vs.83.4%±1.6)、囊胚率(51.9%±1.5vs.39.6%±1.5)和囊胚细胞数(62.2±1.6vs.50.7±1.2)均有显著提高(P<0.05)。检测成熟培养22和36h卵母细胞核相,发现t10c12CLA可加快卵母细胞减数分裂进程。Western Blot结果显示,添加t10c12CLA可显著提高成熟过程中MAPK3/1的活性及COX-2蛋白的表达量：它还可以提高MII期卵母细胞中MAPK3/1的磷酸化水平。在U0126存在时,t10c12CLA可部分恢复U0126对卵母细胞成熟及卵丘扩展的抑制作用,且可完全恢复U0126对COX-2表达的抑制作用。此外,t10c12CLA可完全恢复NS398对卵丘细胞扩展和卵母细胞成熟的抑制作用。但当U0126和NS398同时存在时,添加t10c12CLA不再有恢复效果。对成熟培养44h的卵母细胞进行胞质成熟评定,结果显示t10c12CLA显著提高成熟卵母细胞中谷胱甘肽(Glutathione, GSH),降低活性氧(Reactive oxygen species, ROS),提高卵母细胞的氧化还原能力。其次,选用最适浓度的t10c12CLA (50μmol/L)添加在体外成熟培养体系中,卵母细胞成熟至MII期后,采用Cryotop法对其进行玻璃化冷冻保存。结果表明,添加t10c12CLA显著提高卵母细胞冷冻·解冻后孤雌激活早期胚胎的囊胚发育率(25.43%±2.14vs.11.76%±0.62),并可提高脂肪颗粒形态正常(N型)卵母细胞的比例。用透射电子显微镜观察冷冻·解冻卵母细胞内部超微结构,发现t10c12CLA可有效改善冷冻.解冻后卵母细胞内脂肪颗粒的破碎、溢出及融合等现象；还可缓解冷冻·解冻引起的线粒体“簇状”不均匀分布及线粒体极性降低等损伤。最后,于猪孤雌激活后早期胚胎的培养体系中添加不同浓度的t10c12CLA,发现50μmol/Lt10c12CLA提高培养第5天囊胚发育率(34.54%±0.95vs.26.48%±2.19)和囊胚细胞数(54.65±1.63vs.48.67±2.14)。对8-细胞期胚胎中E-Cadherin表达量和胚胎质量相关指标进行检测,结果表明,与对照组相比,t10c12CLA可显著提高E-Cadherin在8-细胞胚胎中的表达,且显著增加多细胞(n>60)囊胚在总囊胚中的比例(40.79%±1.61vs.28.43%±1.14)。综上所述,t10c12CLA通过调节MAPK活性及COX-2表达量促进猪卵母细胞核成熟,通过提高卵母细胞内MAPK活性及氧化还原能力促进猪卵母细胞的胞质成熟。经添加t10c12CLA成熟培养的卵母细胞,在冷冻保存过程中,胞内线粒体极性升高,维持线粒体的正确分布,并可保护脂肪颗粒经历低温打击后形态的完整性,进而提高冷冻·解冻后卵母细胞的发育潜力。在猪孤雌激活产生的早期胚胎发育过程中,t10c12CLA可提高8-细胞胚胎中E-Cadherin的表达,促进桑椹胚致密化,进而加速囊胚的形成,提高胚胎质量。