乳酸菌胞外多糖的抗氧化活性及其结构

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乳酸菌胞外多糖(EPS)不仅具有良好的流变学性质和公认安全特性,越来越多的研究表明它具有明显的抗氧化活性。这些得天独厚的优势使其在抗氧化领域备受关注。本文筛选了一株产高抗氧化活性EPS的乳酸菌,分离纯化其EPS并测定结构,研究了其体外抗氧化能力及对细胞氧化损伤的保护作用,为乳酸菌EPS在食品、医药和化妆品等领域的研发应用奠定理论基础。通过对DPPH·、OH·、O2-·清除能力及还原能力的综合评价,从15株乳酸菌中筛选出一株植物乳杆菌L. planterum LP6,所产EPS具有很高的抗氧化活性。其胞外粗多糖(CEPS)经DEAE-Sepharose FF离子交换色谱和Sepharose CL-6B凝胶排阻色谱纯化得到的主要级分之一EPS-3占CEPS总量的71.3%。EPS-3具有良好的体外抗氧化活性,清除DPPH·、OH·和O2-·的EC50值分别为1.38、3.43和0.11mg/mL,5mg/mL时还原能力A700nm为0.632,显著高于CEPS和其他两个级分(p<0.05)。模拟人体胃肠道环境,发现其完好存在其中并发挥抗氧化作用。紫外扫描图谱表明EPS-3中几乎不含蛋白质。硅胶板层析和高效凝胶渗透色谱证明EPS-3为均一多糖。高效凝胶渗透色谱法测定EPS-3分子量为5.73×105Da。离子色谱法表明EPS-3主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸按摩尔比9:6:3:1组成。红外图谱分析表明EPS-3是一种含有少量糖醛酸的酸性吡喃聚糖。EPS-3对由H2O2诱导所致氧化损伤的PC12细胞有明显保护作用。EPS-3浓度为200μg/mL时,能显著提高细胞存活率21.67%,提高细胞总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力分别达65.81%、41.34%和59.05%。同时显著降低胞内丙二醛生成量和胞外乳酸脱氢酶泄漏量约52.80%和30.24%。形态学研究表明,EPS-3具有维持氧化损伤PC12细胞形态完好,抑制细胞膜损伤的作用。综上所述,本研究获得了一种具有高抗氧化活性的乳酸菌胞外多糖,通过体外和细胞实验证实了该多糖的抗氧化特性,解析了胞外多糖的结构特性,进一步丰富了乳酸菌的益生理论,同时也拓展了乳酸菌胞外多糖作为抗氧化剂的应用前景。
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