目的：嘌呤受体表达于多种组织中，其中包括了垂体组织。最新的研究表明，嘌呤配体即腺苷(Adenosine)以及三磷酸腺苷(ATP)，都参与了垂体激素分泌的调节过程，其中包括了ACTH的分泌，然而它们的作用尚为阐明。本实验我们利用AtT20型垂体促皮质激素分泌细胞研究了嘌呤配体及其受体在ACTH合成中可能的作用，以及嘌呤受体激动剂对POMC基因转录的影响，同时我们还检验了所研究细胞中表达的嘌呤受体类型。 方法：选用了AtT20PL细胞，它属于鼠垂体促皮质激素分泌细胞系，在其5端启动子-荧光素酶结合基因被永久性转染。我们用经典的嘌呤受体激动剂腺苷和三磷酸腺苷来干预AtT20细胞，并运用荧光素酶实验方法，通过限定的时间间隔和剂量，来研究POMC基因的转录情况。用ACTHIRMA试剂盒研究对ACTH分泌的影响。再利用RT-PCR来分析AtT20细胞所表达的嘌呤受体的分型。 结果：首先我们用RT-PCR发现了，在AtT20型促皮质激素分泌细胞中除了A3,P2X2和P2Y6型嘌呤受体外，绝大多数嘌呤受体被表达。接下来我们研究了两个经典的嘌呤受体激动剂Adenosine和ATP对POMC基因的影响，研究表明这两种激动剂都显著增强POMC基因的转录活动，其中时间依存性研究揭示，两种激动剂在第5个小时达到最大促POMC基因转录作用；剂量依赖性研究表明，Adenosine和ATP分别在10uM和100uM时为最大效果。我们还研究了嘌呤受体激动剂和CRH的联合作用，CRH是ACTH合成及分泌的主要调节者，CRH、Adenosine和ATP单独作用都显著刺激POMC基因的表达，但有趣的是，当它们同时作用时显示了大于附加作用的效果，而是协同作用的表现。这些结果暗示了嘌呤受体的配体(adenosine和ATP)充当着CRH对POMC基因表达机制的增强子的角色。为了判断嘌呤受体的配体增加POMC基因表达的细胞内信号传导途径，我们预先把H89加入到培养细胞中，H89是蛋白激酶A的一个抑制剂，结果发现H89完全废除了CRH和Adenosine的促转录作用，暗示了cAMP/PKA途径的存在。相反H89不能够废除ATP的刺激作用，揭示了还存在非cAMP/PKA传导途径。可见，促皮质激素分泌细胞POMC基因表达的嘌呤调节机制是复杂多样的。最后，我们研究了嘌呤受体激动剂对ACTH分泌的影响。正如我们所预料的，CRH在3小时内显著促进ACTH的分泌。但相反的是，在我们的实验条件下，Adenosine和ATP既没有促进ACTH的基础分泌，也没有提高CRH的作用。 结论：本实验的研究结果展示了，嘌呤受体激动剂(adenosine和ATP)参与了编码ACTH的POMC基因的转录调节机制中，尽管它们单独的调节作用不及CRH强，但是当它们和CRH同时使用时，却有着潜在的显著增强CRH效果的作用，暗示adenosine和ATP充当着CRH调节作用增强子的角色。正如我们知道的，在机体adenosine和ATP经常和其它激素共同释放出来，这说明adenosine和ATP很可能通过自分泌和旁分泌的途径，来调整垂体激素的合成，其中包括了促肾上腺素细胞的ACTH分泌。