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目的观察苁蓉舒痉颗粒对鱼藤酮制备的帕金森病模型大鼠认知功能的影响与海马神经营养因子MANF、PI3K/PTEN/Akt-JNK通路、凋亡相关因子之间的关系,探讨其对PD模型大鼠认知功能发挥保护作用的可能机制。方法采用鱼藤酮葵花油乳液建立帕金森病认知功能障碍模型大鼠,将造模成功大鼠随机分为模型组和苁蓉舒痉颗粒组,另设溶剂组(注射等体积的葵花油)及正常组。苁蓉舒痉颗粒组进行灌胃给药,其他组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃14天。于造模结束后对大鼠进行行为学(悬挂实验、方桥实验、水迷宫实验)观察,HE染色观察各组大鼠海马CA1区细胞形态及数目,免疫组化检测大鼠黑质TH的表达情况;WB检测大鼠海马区神经营养因子MANF、PI3K/PTEN/Akt-JNK信号通路相关蛋白、凋亡相关因子Bcl-2、Bax等蛋白的表达情况。结果1行为学检测结果1.1悬挂实验、方桥实验:鱼藤酮造模14天后,同正常组相比,模型组和苁蓉舒痉颗粒组大鼠悬挂时间缩短(P<0.01)、方桥停留的时间缩短(P<0.01);苁蓉舒痉颗粒给药7天、14天后,同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组大鼠悬挂时间延长(P<0.05、P<0.01)、方桥停留的时间延长(P<0.01、P<0.01)。1.2水迷宫实验:1.2.1定位航行实验:鱼藤酮造模14天后,同正常组相比,模型组、苁蓉舒痉颗粒组逃避潜伏期时间延长(P<0.01)。苁蓉舒痉颗粒给药7天、14天后,同正常组相比,模型组逃避潜伏期时间均延长(P<0.01);同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组逃避潜伏期时间均缩短(P<0.01)。1.2.2空间探索实验:鱼藤酮造模14天后,同正常组相比,模型组、苁蓉舒痉颗粒组空间探索跨越平台次数、空间探索原平台象限停留时间减少(P<0.01)。苁蓉舒痉颗粒给药7天、14天后,同正常组相比,模型组空间探索跨越平台次数、空间探索原平台象限停留时间均减少(P<0.01);与模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组空间探索跨越平台次数、空间探索原平台象限停留时间均增加(P<0.01)。2 HE染色结果:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,正常组大鼠海马CA1区神经元细胞数量较多,排列整齐、紧密,形态规则,分布均匀,无明显的神经元丢失现象。同正常组相比,模型组大鼠海马CA1区神经元细胞数量减少,排列不整齐,疏松,形态不规则,神经元丢失明显。同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组大鼠海马CA1区神经元细胞数量相对增加,排列稍整齐、紧密,形态稍规则,神经元丢失现象相对减少。3免疫组化结果:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,同正常组相比,模型组TH阳性细胞明显减少(P<0.01);同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组TH阳性细胞明显增加(P<0.01)。4各组大鼠相关蛋白变化4.1神经营养因子MANF:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,同正常组相比,模型组神经营养因子MANF蛋白表达减少(P<0.01),同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组神经营养因子MANF蛋白表达增加(P<0.05)。4.2 PI3K/PTEN/AKT信号通路相关蛋白:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,同正常组相比,模型组PI3K、Akt蛋白磷酸化表达减少(P<0.01),PTEN蛋白磷酸化表达增加(P<0.01)。同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组PI3K、Akt蛋白磷酸化表达增加(P<0.05),PTEN蛋白磷酸化表达减少(P<0.05)。4.3 JNK号通路上相关蛋白:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,同正常组相比,模型组JNK蛋白磷酸化表达增加(P<0.01)。同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组JNK蛋白磷酸化表达减少(P<0.05)。4.4凋亡相关因子蛋白:苁蓉舒痉颗粒给药14天后,同正常组相比,模型组Bcl-2蛋白表达减少(P<0.01),Bax蛋白表达增加(P<0.05)。同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05),Bax蛋白表达减少(P<0.01)。同正常组相比,模型组Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01),同模型组相比,苁蓉舒痉颗粒组Bcl-2/Bax比值增高(P<0.01)。结论1苁蓉舒痉颗粒对PD模型大鼠的行为学及认知功能障碍有一定的改善作用;2苁蓉舒痉颗粒能保护海马CA1区细胞的形态和数量,提高PD模型大鼠黑质TH的含量,抑制神经元凋亡;3苁蓉舒痉颗粒能促进PD模型大鼠海马神经营养因子MANF、PI3K/Akt通路相关蛋白、Bcl-2的表达,抑制PTEN、JNK信号通路相关蛋白、Bax的活性;4苁蓉舒痉颗粒可能通过促进神经营养因子MANF表达、抑制PTEN的活性,从而提高PI3K/Akt通路的活性、抑制JNK信号通路的活性,对PD认知功能障碍发挥神经保护作用。