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背景:银屑病是一种慢性、系统性、炎症性疾病,最常见的类型是寻常型银屑病（Psoriasis Vulgaris,PsV）,占所有亚型的80-90%,通常在遗传易感人群中由于创伤、感染和药物等因素引发([1]。寻常型银屑病的临床标志性特征包括表皮的明显改变,即角质形成细胞过度增殖和异常分化,同时伴显著的炎症细胞浸润[2]。角质形成细胞和T细胞之间相互作用产生的炎症和免疫回路,是寻常型银屑病发生、发展和持续的主要原因[3]。近年来,随着RNA甲基化免疫沉淀测序（Methylated RNA immuneprecipitation with next generation sequencing,MeRIP-seq）技术的产生,RNA修饰领域的科学研究迅速成为热点,并获得了前所未有的发展。其中,m6A甲基化（N6-methyladenosine methylation）是高等真核生物信使 RNA（Message RNA,mRNA）和长链非编码RNA（Long noncoding RNA,LncRNA）中最普遍的内部修饰,是目前研究最为广泛和深入的mRNA修饰,在影响细胞命运和功能的过程中扮演重要角色[4]。m6A甲基化是动态可逆的,这种修饰是由甲基化转移酶（Methyltransferases/“Writers”）写入、可以被去甲基化酶（Demethylases/“Erasers”）擦除、最终由甲基化读取酶（Binding proteins/“Readers”）读取从而发挥下游作用。m6A甲基化的生物学后果发生在分子、细胞和生物学三个水平。在分子水平上,m6A甲基化调控RNA的剪接、转运、定位、翻译和稳定性[5],在转录后水平调控基因表达。在细胞水平上,m6A甲基化决定了多能干细胞的命运,对细胞增殖、分化、发育程序发挥强大而精细的调控作用[6]。在生物学水平上,m6A甲基化通过结合不同阅读蛋白发挥不同的生物学效应构成了不同的生物学结果[7,8]。这些过程都与寻常型银屑病的发病机制密切相关。目前,m6A甲基化在肿瘤、神经系统疾病、免疫性疾病、炎症性疾病、肥胖症和不孕症等人类疾病中的研究正在迅速发展[9-12]。然而,m6A甲基化在寻常型银屑病中的生理意义及调控机制尚不清楚。目的:本课题首先以慢性斑块型银屑病（寻常型银屑病）患者皮损组织为研究对象,检测其中m6A甲基化、m6A甲基化相关酶的水平,并进行相关性分析。之后,以咪喹莫特（Imiquimod,IMQ）诱导的寻常型银屑病样小鼠模型及Mettl3杂合敲除小鼠模型为研究对象,检测METTL3介导的m6A甲基化对寻常型银屑病发生发展的影响。最后通过MeRIP-seq识别寻常型银屑病m6A甲基化改变的转录本。方法:首先,收集20例寻常型银屑病患者及20例健康对照组患者的皮损（皮肤组织）和病历资料,通过RNA m6A甲基化定量检测法（m6A RNA methylation quantification kit）评估皮损总RNA中m6A甲基化水平,通过逆转录-实时荧光定量PCR（Quantitative reverse transcription PCR,RT-qPCR）检测 m6A 甲基化相关酶的水平,并进行相关性分析。之后,建立IMQ诱导的寻常型银屑病样小鼠模型及Mettl3杂合敲除小鼠模型,通过改良寻常型银屑病皮损面积和严重度指数评分（Psoriasis Area Severity Index,PASI）、RT-qPCR、免疫印迹（Western Blot,WB）、免疫组化（Immunohistochemical analyses,IHC）、流式细胞术（Flow CytoMetry,FCM）等方法,检测METTL3介导的m6A甲基化对寻常型银屑病表型、皮损表皮厚度、Th1和Th17细胞比例、炎症细胞浸润、炎症因子表达等的影响。最后通过MeRIP-seq及相关分析识别寻常型银屑病m6A甲基化改变的转录本。结果:寻常型银屑病患者皮损中m6A甲基化及甲基转移酶METTL3表达均显著低于健康对照组皮肤,且两者呈显著正相关。寻常型银屑病患者皮损中m6A甲基化水平、METTL3水平均与PASI评分呈负相关。同时,与人类样本的结果一致,IMQ诱导的寻常型银屑病样小鼠皮损中METTL3的表达水平显著低于健康对照组小鼠,且IMQ组表皮和真皮中的METTL3水平均较健康对照组降低。其次,在IMQ诱导的寻常型银屑病样小鼠模型中,通过杂合敲除Mettl3下调m6A甲基化促进了寻常型银屑病的发展并增加了其严重程度,包括小鼠皮损表型加重、表皮增厚、Th1和Th17细胞比例升高、炎性细胞浸润程度加重及炎症因子水平升高。最后,通过MeRIP-seq发现m6A甲基化下调的转录物高度富集在Wnt信号通路。结论:寻常型银屑病患者皮损中RNA m6A甲基化及其催化酶METTL3显著下调。小鼠实验证明,METTL3下调介导的m6A甲基化下调加重了寻常型银屑病的发生发展。通过MeRIP-seq及分析推测,m6A甲基化下调可能通过调节Wnt信号通路加重寻常型银屑病的发展。