酶编码酶:脱氧核酶→核酶→肽酶

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bellwang99
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
核酶(ribozyme or RNAzyme)是一类具有催化活性的单链寡RNA分子,它能通过碱基配对特异性地切割底物RNA。脱氧核酶(Deoxyribozymeor DNAzyme)是上世纪90年代通过体外筛选获得的一类具有催化活性的DNA分子。 我们以β-内酰胺酶mRNA为靶目标,设计并合成了DNAzyme-RNAzyme(DR)基因,将其克隆到pBluescript II KS(+) phagemid中,筛选得到重组子,通过噬菌粒复制产生含有DNAzyme序列的单链环状DNA分子(CDR)。体外实验表明,CDR在某些二价金属离子辅助下具有特异性切割RNA底物的功能。重组噬菌粒经体外转录后(T3启动子),其转录产物(LDR)含RNAzyme序列,体外实验表明,LDR也有特异切割底物RNA的活性。考虑到CDR与LDR都具有切割单链RNA活性,根据中心法则,我们合成了DR基因编码多肽(PDR),实验证明PDR也能切割单链RNA。这样,我们通过合理设计实现了DNAzyme→RNAzyme→pepzyme。DNAzyme→RNAzyme→pepzyme可能是中心法则的一种模型。体内实验中,将CDR电转化Ampr耐药菌株TEM-1和TEM-3,CDR在胞内有较高的抑菌效率。 我们进一步研究了核酶与脱氧核酶编码多肽的活性,发现锤头核酶、HDV核酶以及RNaseP开放阅读框序列编码的多肽均具有切割单链RNA的作用。我们将由核酶编码的具有催化活性的多肽称为核肽酶(ribopepzyme)。根据DNAzyme→RNAzyme→pepzyme以及核酶编码核肽酶,我们提出了“酶编码酶”的概念,“酶编码酶”将早期进化中的DNA、RNA、蛋白质(多肽)联系起来。
其他文献
本文主要研究具有依赖于空间变量x系数的非线性波动方程的时间周期解。全文内容共分六章,第一章是绪论,从第二章到第六章为论文主体部分。 在第二章,我们主要研究Sturm-Liouville边值条件下具有次线性增长非线性项的一维波动方程。通过深入而细致地分析Sturm-Liouville边值条件下波算子的谱的形式和渐近特征,给出了波算子的一些性质,然后利用对偶变分方法和极大单调原理
为探讨多药耐药基因(mdr1)导入人胎盘源性间充质干细胞(MSCs)能否提高其对化疗药物的耐受性,我们采用灌流法联合密度梯度离心法自胎盘组织中分离扩增MSCs,脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清重复感染MSCs,通过RT-PCR、流式细胞术及免疫荧光染色检测mdr1基因在MSCs基因组中的整合和表达,同时对转染细胞的生物学特性及多向分化潜能加以测定
本文以B样条曲面作为主要的造型工具,针对在曲面造型过程中经常遇到的几何连续性问题,研究了在内部单节点和重节点两类情况下邻接B样条曲面间G~1、G~2连续的条件以及用局部格式构造G~1、G~2连续曲面的问题。 本文的主体共分四部分。第一部分,主要研究邻接内部单节点B样条曲面间G~1连续的条件以及用局部格式构造G~1连续曲面的问题。首先,推广了施锡泉等人提出的“本征方程”条件以及
基因治疗有可能成为人类最终征服许多难治性疾病的一种新的治疗手段。如何将目的基因安全、高效、靶向性地导入人体内特定器官、组织,并在靶细胞内表达是目前有待解决的难题之一。 我们观察了成纤维细胞在诊断剂量的超声波及联合应用超声造影剂作用下的电镜改变,发现细胞膜表面形成一些可逆性的小孔。说明诊断剂量的超声波联合超声造影剂对细胞的损害作用是轻微的、可逆的。 我们观
本文主要讨论了当数据有舍入误差时对统计推断的影响。由于观测样本具有舍入误差时,传统的(或标准的)统计方法往往失效。在这种情形下,如何对统计模型中的参数进行合理的估计就变得尤为重要。本文着重考察三种经典统计的情形:独立同分布的情形、线性回归模型和时间序列模型。对于独立同分布的情形,给出了四舍五入数据的极大似然估计,并且在密度函数满足一定的光滑条件下,证明了MLE是相合的和渐近正态性。对于线性回归模型
近十几年来,基于激光等离子体加速器技术的桌面型“类同步辐射”X射线源——Betatron射线源取得了巨大的进展。Betatron射线由激光等离子体加速器中高能电子束横向振荡产生,拥有媲美第三代同步辐射光源的峰值亮度、微米级源尺寸以及飞秒级的脉冲长度等特点,是一种卓越的紧凑型光源,在高品质成像和飞秒探测相关领域中拥有巨大的潜力。但是目前存在两个亟需解决的、大大限制其实际应用的问题——稳定性不够、光子
本文主要研究了平面分片光滑动力系统中连接轨道的数值计算方法和分支理论。我们用扩展方程的方法构造并分析了平面分片光滑系统中的连接轨道的数值计算方法,并给出了误差分析,同时提出了分片光滑系统中同宿轨道的非退化条件,这一条件保证了同宿轨道是扩展方程的正则解。之后,将分片光滑同宿轨道的计算方法应用于一类碰撞振荡系统中,得到了此系统的Melnikov函数的近似计算方法,并分析了同宿轨道的截断误差对计算Mel
学位
本文主要利用Hamiltonian系统中经典的KAM理论,对非自治的非线性Schr(?)dinger方程的Dirichlet边值问题进行了较为深入的研究.文中通过适当的变换u=εv(0<ε<<1),有效地处理了方程中出现的小除数问题,建立了非自治的非线性Schr(?)dinger方程的Hamiltonian函数,给出了该方程的Birkhoff标准形式及相应的Cantor流形定理,较好的解决了非自治
本文利用分子力学,分子动力学和量子化学方法,对七种蛋白体系进行了三维结构预测,分子对接及量子化学计算的理论研究。主要内容包括: 1.利用同源模建和分子动力学模拟,得到了茉莉酮酸甲酯的三维结构。在与底物茉莉酮酸甲酯的对接研究中,发现Thr107, Leu214是活性位点中比较重要的氨基酸残基。在与抑制剂苯甲基磺酰氟的对接研究中发现His240, His82在复合物的结合中起重要
学位
抗菌肽属自然免疫的一部分,是生物体免疫防御的第一道防线,可以抑制微生物生长、阻止微生物入侵。本论文研究一种从中国林蛙皮肤中得到的抗菌肽RTCI。 本研究从中国林蛙皮中纯化得到了一种具有特殊荧光性质的抗菌肽RTCI。 研究了此抗菌肽针对多株吉林省内医院中分离的多重耐药菌的抗菌活性。结果表明此抗菌肽对多数实验菌株有很好的抑制/杀伤作用。并利用浓度依赖的杀菌进
学位