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目的心房纤维化是心房结构重塑的一个重要标志,在慢性心房颤动发生和发展过程中起着显著的作用。然而到目前为止,心房纤维化与心房颤动的相互关系仍不明确。无标记(Label-free)技术是新近发展及应用的一种蛋白质组学分析技术,它可以对与疾病相关的一系列蛋白进行分析,并实现高通量筛选,从而找出对疾病发生发展起重要作用的关键蛋白。因此,我们拟采用这种无标记的蛋白质组学技术对患有二尖瓣疾病并伴有慢性房颤的患者进行差异蛋白的筛选与分析。方法于二尖瓣患者换瓣手术中获取患者的左、右心耳,随即分为慢性房颤组(CAF组,AF=6个月,6例)和窦性心律组(SR组,6例)。其中一部分样品被用于组织学分析和纤维化程度定量;其余样品利用无标记蛋白质组学结合液相色谱与质谱(LC-MS)进行分析,并利用生物信息学找出并确定差异蛋白。结果纤维化半定量结果显示CAF组患者的心房纤维化程度明显高于SR组患者。两组之间共找出223个差异蛋白。这些蛋白质均在细胞及组织生物学行为中发挥着重要作用,如细胞增殖,应激反应,细胞间粘附和凋亡等。生物信息学随后评估和分析了丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(PKN2),皮肤桥蛋白(DP),S100钙结合蛋白B(S100B),酪氨酸蛋白激酶2(PTK2)和盘状结构域受体酪氨酸激酶2(DDR2)这几种关键蛋白在与慢性房颤相关的心房纤维化中所发挥的重要作用及其相互关系,发现这些蛋白在慢性房颤心房纤维化过程中扮演重要角色。结论本研究通过无标记的蛋白质组学技术分析了慢性房颤患者心房纤维化的相关差异蛋白,并对其中几个非常重要的蛋白的特点和作用进行了讨论。这种对心房纤维化在蛋白水平上的高通量研究可能为心房颤动的机制研究开辟新视野,提供新思路。目的心房纤维化是心房结构重塑的一个重要特征,在慢性心房颤动的发生发展过程中扮演重要角色,但其机制尚不明确。粘着斑激酶(FAK)作为非受体酪氨酸激酶家族中的一员,其在纤维增生过程中发挥着重要的调节作用。因此,本研究拟探索FAK是否参与慢性房颤患者心房纤维化过程,及其在蛋白信号通路中起何作用,并对其介导的下游信号通路进行探究。方法共有45名二尖瓣疾病患者纳入本次研究,根据有无房颤分为慢性房颤组(CAF, AF>6个月,25例)和窦性心律组(SR,20例)。术中获取心耳组织进行组织学病理检测和蛋白免疫印迹。进一步培养乳鼠心脏纤维母细胞,通过转化生长因子β1(TGFβl)对其诱导分化,观察FAK及其下游通路在成纤维细胞分化过程中发挥的作用。结果本研究揭示了慢性房颤患者FAK及下游通路的变化,发现FAK能够通过调节其下游信号而引发成纤维细胞分化。组织学检测提示慢性房颤患者纤维化程度较窦性心律患者显著增高,TGFβ1诱导心脏成纤维细胞分化,使成纤维细胞分化标志蛋白a平滑肌肌动蛋白(a-SMA)表达升高,由此发生的磷酸化FAK和下游AKT/S6K通路蛋白表达均发生上调,FAK及AKT抑制剂能够抑制a-SMA的表达,而ERK1/2信号通路与慢性房颤心房纤维化无明显关系。结论FAK介导的AKT/S6K信号通路参与了慢性房颤相关的心房纤维化过程,提示房颤与心房纤维化在分子水平上存在潜在联系。本研究对器质性心脏病伴慢性房颤患者心房纤维化的预防提供思路。