本文采用现阶段国际社会认可的中药指纹图谱技术建立高良姜饮片的HPLC指纹图谱,同时建立其主要成分—高良姜素的含量测定方法,并初步探讨高良姜饮片中高良姜素和高良姜素单体在大鼠体内的吸收和排泄情况,为完善高良姜饮片质量标准提供科学依据。一、中药高良姜HPLC指纹图谱研究目的:采用高效液相色谱法建立高良姜饮片的HPLC指纹图谱,同时测定各样品中高良姜素的含量,为高良姜饮片的质量控制提供新方法。方法:以phenomenex C18柱(4.6mm*250mm,5um)为色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶剂系统,线性梯度洗脱,检测波长为280nm(高良姜素含量测定波长为235nm);对各批样品色谱图采用指纹图谱相似度软件进行数据分析。结果:确定了高良姜饮片9个共有峰,建立了14批样品的共有图谱,并比较了各样品中高良姜素的含量。在此基础上,对14批样品图谱信息进行了聚类分析,探讨药品质量与产地、品型、生长区域等的相关性。结论:采用指纹图谱信息结合有效成分含量测定的方法,可以较为全面的评价高良姜饮片的质量。二、高良姜素在大鼠体内吸收和排泄的初步研究目的:采用指纹图谱的检测方法,探讨分别以高良姜饮片提取物及高良姜素单体灌胃后大鼠血清、尿液、粪便中的高良姜素变化情况。方法:①采用SD大鼠12只,雌雄各半。随机分组,禁食24h,自由饮水,分别灌胃高良姜饮片提取物和高良姜素单体药物。收集大鼠灌胃前24h空白尿液、粪便及灌胃后24h尿液、粪便,所有收集的样品置-4℃保存。粪便样本用95%乙醇提取后再处理。②采用SD大鼠,随机分为高良姜饮片提取物组,高良姜素单体药物组,空白对照组,分别对应8个采血点:0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、4h、6h,采集各时间点血液样本。采集到的全血样本置离心机离心,吸取血清备用。③血清、尿液、粪便提取物,用乙酸乙酯萃取三次,收集乙酸乙酯层,置80℃水浴挥干乙酸乙酯,甲醇复溶后,吸取上清进样分析,色谱条件采用指纹图谱条件,检测波长267nm。结果:1.不同灌胃组大鼠的血、尿、粪样品中均检测到高良姜素原型,但以尿、粪中含量较高,血清中含量很低,所采集时间点出现一个最高血药浓度时间点,其余时间点几乎检测不到高良姜素,初步表明高良姜素可通过胃肠道吸收入血,但可能在机体内转运很快。2.两组高良姜素吸收和排泄情况有差异:饮片提取物组高良姜素最高血药浓度时间点为2.5h,而单体高良姜素组最高血药浓度时间点为1.5h;另外,饮片提取物组高良姜素尿液中含量占排泄总量(尿液和粪便含量之和)的百分比为32.7—55.0%,单体组高良姜素尿液含量占排泄总量的百分比为3.6—31.8%,饮片提取物组的色谱图也比单体组色谱图复杂。初步表明以中药饮片整体入药和以单一化学成分入药对机体产生的影响不同。结论:中药成分复杂,单体成分与饮片整体药效质量无绝对相关性,只有将整体中药原型化学成分研究与体内过程研究结合起来,才能更好地阐明中药作用的物质基础和作用机制,制订科学的质量标准。