牛蒡叶中绿原酸提取与纯化工艺研究

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绿原酸是中药中主要有效成分,具有显著的清热解毒、抗菌消炎作用,同时还具有增香和护色功能,可用于食品和果品的防腐保鲜。在详细总结了目前绿原酸提取与分离方法的基础上,本论文主要研究牛蒡叶中绿原酸的提取、分离、纯化工艺,并对提取物含量进行测定。研究结果如下:   1、分析方法建立采用薄板层析-紫外分光光度法,确定了绿原酸的最大吸收波长为 328nm。应用薄板层析法来定性检测绿原酸的存在,找到了较为理想的展开剂正丁醇:乙酸:水=4:   1:5(V/V)上清液,使得粗提物中各种杂质有效的分开,而且绿原酸的Rf 值较为合适。   结果表明:用紫外可见分光光度法测定牛蒡叶中的绿原酸含量,相对标准偏差较小,说明测定结果重现性好,精密度较高,所得数据准确可靠。   2、提取工艺   两种提取绿原酸方法进行比较。首次将微波提取技术应用于牛蒡叶中绿原酸的提取,同时与常规乙醇浸提法进行比较,确定了合适的工艺参数。采用常规乙醇浸提响应曲面分析法,对影响绿原酸得率的主要因素进行了分析,得到了从牛蒡叶中提取绿原酸的最佳工艺条件:用31%乙醇,1:29的料液比在76℃提取2h,浸提1 次,绿原酸的得率约为0.826%;通过单因素试验及L9(34)正交试验,确定微波-乙醇法提取牛蒡叶中绿原酸条件为:40%(v/v)的乙醇、pH 为4.0、料液比为1:25(w/v)时,微波功率为480W,提取时间为150S,浸提1 次,绿原酸得率达到0.81%。研究证明:微波提取法效果最佳,快速、高效,而且选择性好、稳定性高、耗低,前景突出。   3、纯化工艺   研究大孔吸附树脂纯化绿原酸的最佳工艺条件和参数。通过比较四种大孔树脂对绿原酸的吸附和解吸附性能,得Jt012 树脂吸附和解吸附性能较好。吸附参数如下:   吸附液绿原酸的浓度为 0.4mg·mL-1、吸附液 pH 值为4、流速为2BV/h;解吸参数如下:解吸剂为4BV的40%乙醇、解吸剂流速为2BV/h,在此条件下,得到含绿原酸26.7%的粗产品,收率为 71.7%。   4、硅胶柱纯化绿原酸绿原酸混合品可以经硅胶柱分离得到,用V(氯仿):V(甲醇)=8:2 洗脱液,正丁醇:   乙酸:水=4:1:5(V/V)上清液作为展开剂较为合适,可以很好地进行分离。HPLC 测的绿原酸混合品峰面积4479.70,纯度在73.3%以上,为进一步作药理实验打下了基础。
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