化学发光是物质在进行化学反应时伴随的一种光辐射现象,具有高灵敏、易操作、仪器简单、低成本等优点,在临床诊断、食品检测和生物分析等方面具有广泛应用。与荧光方法相比,化学发光方法不需要激发光源,避免了自体荧光的干扰,极大地提高了信噪比,在生物传感检测特别是生物成像分析领域具有很大潜力。辣根过氧化物酶（HRP）-luminol-H₂O₂是最常用的一种酶催化化学发光体系,然而该体系具有发光时间较短、发光强度稳定性差等缺点,且生物酶易失活,修饰复杂,极大的限制了该化学发光体系在生物成像分析中的应用。针对上述问题,本论文制备铁卟啉金属-有机框架材料纳米模拟酶（FePorMOF）,构建双酶局域级联反应,发展高强度且长时间稳定的辉光型化学发光体系,具体工作如下:1.基于FePorMOF/葡萄糖氧化酶的双酶型辉光化学发光体系制备铁卟啉金属-有机框架材料/葡萄糖氧化酶（FePorMOF/GOx）纳米复合物,基于局域双酶级联催化和纳米材料表面局域扩散效应,发展辉光型化学发光体系。本工作中FePorMOF是以Zr Cl₄为金属中心、铁卟啉（Fetcpp）为配体,通过水热法制备而成,具有较高的过氧化物酶活性;FePorMOF/GOx是通过在FePorMOF表面静电吸附修饰GOx而制备,具有较好的稳定性。以FePorMOF/GOx双酶复合物为化学发光反应的催化剂,以鲁米诺和葡萄糖为化学发光底物,该体系（FePorMOF/GOx-luminol-glucose）可以产生7.5小时稳定的高强度化学发光发射。在该化学发光体系中,受酶反应和底物扩散控制,H₂O₂能在位持续生成,所以产生长时间发光;另外,该化学发光反应基于FePorMOF和GOx的局域级联催化,无扩散限制,反应效率高,所以发光强度高。该FePorMOF/GOx化学发光体系以葡萄糖为底物,可产生长时间稳定的高强度化学发光发射,在生物检测和成像方面具有较好的应用前景。2.基于双酶型辉光化学发光体系发展均相实时免疫分析方法在FePorMOF和GOx的双酶辉光化学发光体系中,通过表面位阻效应,发展了一种均相实时免疫分析方法。本工作以修饰了抗体的FePorMOF（FePorMOF/Ab1）和GOx为联合催化剂,以鲁米诺和葡萄糖为底物,构建辉光型化学发光体系。当目标抗原存在时,在FePorMOF表面形成夹心免疫复合物,产生表面位阻,阻碍发光底物扩散至FePorMOF的活性中心,导致化学发光信号下降。以甲胎蛋白（AFP）为模型分子,该方法可以对0.5-1000 ng/m L范围内的AFP进行均相实时检测。3.辉光型化学发光纳米探针的制备合成包覆有FePorMOF、GOx和发光底物L-012的一体化化学发光纳米探针,使其在生理葡萄糖浓度下持续稳定的产生高强度化学发光。该辉光型化学发光纳米探针在生物成像尤其是动态监测方面具有较好的应用前景。