肉鸡Ex-FABP和ADD1基因的遗传多态性及其组织表达谱分析

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细胞外脂肪酸结合蛋白Ex-FABP基因是脂肪酸结合蛋白家族中的一员,它参与鸡的脂肪酸、肌纤维、骨骼等调控过程,是机体脂肪代谢过程的重要调控因子之一。α-内收蛋白ADD1基因是一种细胞膜骨架蛋白,它参与细胞信号转导、协同转运系统和胞膜离子的转运,推测它可能通过调节这些途径对家禽的脂肪代谢起作用。本文以快大青麻、矮D、土2、灵山土鸡和乌骨鸡为研究对象,利用分子生物学技术研究Ex-FABP和ADD1基因的遗传多态性,比较不同群体内基因型的分布规律,分析基因遗传变异与胴体和脂肪性状的关系;同时用实时荧光定量PCR技术分析Ex-FABP和ADD1基因在肉鸡不同组织中的表达规律。主要研究结果如下:1、肉鸡Ex-FABP基因多态性及其与胴体和脂肪性状的关联用AS-PCR的方法对Ex-FABP基因进行多态性的检测,发现其有三种基因型:AA、BB和AB型。对该位点的多态性与胴体及脂肪性状进行关联分析,结果表明:快大青麻鸡和灵山土鸡中,不同基因型间的各性状没有显著差异;矮D母鸡中,AB型个体的腹脂率显著高于AA型个体;土2公鸡中,BB型的腹脂重、腹脂率显著高于AA和AB型个体;土2母鸡中,BB型的腹脂率显著高于AA和AB型个体;乌骨鸡公鸡中,BB型个体的腿肌率的含量显著高于AB型个体。2、肉鸡ADD1基因多态性及其与胴体和脂肪性状的关联利用PCR-RFLP和DNA测序法检测出ADD1基因外显子8存在一个突变位点(C→T),经分析为同义突变,编码亮氨酸(Leu,L);用SB-ASA法检测出三种基因型:TT、CC和TC型。分析ADD1基因不同基因型与肉鸡胴体和脂肪性状的关系,结果表明:快大青麻母鸡中,TC型个体的腿肌率显著高于TT型和CC型个体;矮D公鸡中,TC型个体的胸肌重显著高于CC型个体;土2公鸡中,TC型个体的全净膛率显著高于CC型个体,TC型个体的胸肌重显著高于TT型个体;土2母鸡中,TT型个体的腿肌重、腿肌率显著高于CC型和TC型个体;乌骨鸡中,不同基因型的各性状间没有显著差异;灵山土鸡母鸡中,TC型个体的宰前活重、胴体重、半净膛重显著高于CC型个体,CC型个体的腿肌重显著低于TT型和TC型个体,TT型个体的腿肌率显著高于CC型个体。3、Ex-FABP和ADD1基因在肉鸡不同组织中的表达差异利用荧光定量PCR技术研究Ex-FABP和ADD1基因在肉鸡的13种组织中的表达量,结果表明:Ex-FABP基因在肺中表达量最多,其次是小脑、垂体、腹脂,在心脏、肝脏、腿肌中表达量相对较少,在脾脏、肾脏、胰腺、大脑、下丘脑、骨骼肌中表达量最少;ADD1基因在心脏、大脑、下丘脑、垂体中的表达量最高,其次是肾脏、腿肌,在肝脏、脾脏、肺、胰腺、腹脂重的表达量较少,在小脑、骨骼肌中几乎不表达。
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