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本研究包括3个试验,用于研究α-亚麻酸在体外发酵中不同浓度及不同日粮比例下的氢化过程及对瘤胃发酵参数,甲烷生成的影响。主要研究工作如下:试验一:不同比例α-亚麻酸对瘤胃体外发酵特性及生物氢化代谢产物的影响本试验采用体外法添加不同浓度游离的α-亚麻酸,研究对瘤胃发酵模式及C18不饱和脂肪酸氢化过程的影响。设4个组,分别添加干物质基础(w/w)的0%(对照,CON)、1.5%(低添加量,LL)、3.0%(中添加量,ML)、4.5%(高添加量,HL)的α-亚麻酸,3个重复。结果表明:ML组、HL组氨氮、总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸、丁酸浓度均显著低于CON组(P<0.05),丙酸浓度极显著高于CON组(P<0.01)。在6h、9h和12h,培养过程中LL组与CON、MM和HL组相比氢气产量皆为最高(P<0.01)。在3h,与CON组相比,随α-亚麻酸添加量升高,C02和CH4产量逐渐下降(P<0.01)。CON组及LL组亚油酸(c9,c12-C18:2)浓度随培养时间延长而下降,其余两组随时间升高,在12hML组达到最大值,超过CON组和LL组(P<0.01)。HL组c9,t11,c15-CLnA, c9,t13,c15-CLnA含量在各时间点显著高于其他组(P<0.01)。ML组、HL组在12h时共轭亚油酸(CLA)及共轭亚麻酸(CLnA)的含量显著高于其他组(P<0.01)。因此饲粮中添加α-亚麻酸可以改变瘤胃发酵模式,降低C02和CH4的产量,且抑制作用随添加量增加而增强。产生多种C18:1异构体,促进瘤胃液内t11,c15-C18:2及共轭亚油酸(CLA)和共轭亚麻酸(CLnA)的累积,且总CLnA与α-亚麻酸存在剂量效应关系。试验二:不同粗精比条件下添加α-亚麻酸对瘤胃生物氢化代谢产物的影响本试验采用体外法在不同日粮配比中添加α-亚麻酸,研究对瘤胃发酵模式及α-亚麻酸氢化过程的影响。设5个粗精水平,分别为粗精比8:2、6:4、5:5、4:6和2:8(w/w),在每组中都添加3.0%的α-亚麻酸(w/w)。每个水平设3个重复。结果表明:在各时间点,随着精料比例的增加,pH呈上升趋势,且2:8组与其余4组比较差异显著(P<0.05)。添加α-亚麻酸条件下,不同粗精比对TVFA影响不显著。6h和12h,乙酸浓度一直与精料比例呈反比。各组丙酸浓度随时间变化迟缓,4:6组丙酸浓度在各时间点均高于其他组,且差异极显著(P<0.01)。2:8组NH3-N浓度在各时间点均大于8:2、6:4组,且差异极显著(P<0.01)。随精料比例的增加,各时间点CH4, C02和产气量均呈增加趋势。T11-C18:1整个培养时间内随粗料的比例升高而增加。8:2组t11-C18:1在3h与其他4组比较无显著性差异(P>0.05);6h、12h, CLA浓度各组均无显著差异。c9,c12-C18:2浓度与粗料比例呈正比关系,粗料增加总CLnA显著增加,8:2组浓度在整个培养过程与其他组比差异显著(P<0.05)。因此在添加α-亚麻酸条件下,粗料比例增加可以增加瘤胃液中乙酸和TVFA含量,降低丙酸和NH3-N含量。升高精料比例可以增加总产气量和C02的产生,同时减少CH4的生成。高精料通过降低TVFA增加瘤胃中pH。试验中添加α-亚麻酸时,促进了氢化微生物对亚麻酸的氢化作用,同时抑制了对亚油酸的氢化过程。试验三:运用Real Time-PCR检测α-亚麻酸及日粮配比对氢化微生物的影响本试验旨在对试验一,二中6h,12h样品,运用Real Time-PCR检测α-亚麻酸及日粮配比对氢化微生物的影响,为α-亚麻酸对瘤胃调控结果及其氢化过程提供基础参考。对试验一,二两个时间点样品进行处理,提取DNA,纯化,运用运用Real-time PCR技术,对B. fibrisolvens、B. proteoclasticus和B.flavefaciens的数量的变化进行监测。结果表明:6h B. fibrisolvens, B. proteoclasticus和B. flavefaciens的DNA量与α-亚麻酸添加量呈反比,且各组差异极显著(P<0.01)。6h-12h,三种菌DNA量均升高。12h, B. fibrisolvens, B. proteoclasticus的DNA量随亚麻酸添加极显著降低(P<0.01),而B.flavefaciens的DNA量在ML组达到最高。随粗精比升高,6h和12h的B. fibrisolvens, B. flavefaciens逐渐升高,且8:2,6:4,2:8组间差异极显著(P<0.01),5:5与4:6组比较差异不显著(P>0.05)。6h, B. proteoclasticus在5:5组达到最大值,与其他组比较差异极显著(P<0.01);12h, B. proteoclasticus在4:6组达到最大值(P<0.01)。因此认为亚麻酸对B. flavefaciens的毒性小于B. fibrisolvens。在添加α-亚麻酸的条件下,日粮中粗饲料比例越高越有利于这三种氢化细菌的生长,且添加α-亚麻酸条件下pH变化与B. flavefaciens和B. fibrisolvens有关。