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土牛臻为苋科牛膝属植物土牛膝Achyranthes aspera Linnaeus的干燥根及根茎,具有活血散瘀,祛湿利尿,清热解毒之功效,在《湖南省中药材标准》2009年版和《湖南省中药饮片炮制规范》2010年版均有收载。主要用于淋病,血尿,经闭。土牛膝产于湖南、江西、福建、台湾等地,印度、越南、菲律宾、马来西亚等地亦有分布。关于土牛膝的物质基础研究国内外报道较少,所含化学成分主要为昆虫变态激素、三萜皂苷(苷元为齐墩果酸)以及多糖。为充分利用土牛膝植物资源,进一步开发土牛膝的药用价值,本文对土牛膝的根及根茎药理活性、主要化学成分及其含量测定进行研究。本研究内容包括：1土牛膝不同部位提取物药理活性筛选对土牛膝不同提取物的抑菌活性和抗炎活性进行研究,筛选出具有药理活性的部分,指导化合物的提取、分离。1.1以金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌和枯草芽孢杆菌为目标菌,采用二倍稀释测定提取物的MIC,研究了土牛膝不同提取物的抑菌作用。实验表明：土牛膝正丁醇萃取物浸膏和土牛膝提取液对金黄色葡萄球菌、铜绿甲单孢茵和枯草芽孢杆茵均无抑菌活性,说明土牛膝的清热解毒功效可能与其抑菌性无关,而是可能与中药复杂成分和对人体作用机理复杂性有关。1.2以巴豆油所致小鼠耳廓肿胀和鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀为模型,研究了土牛膝正丁醇部分提取物的抗炎作用。实验表明：土牛膝正丁醇部分提取物对巴豆油所致的小鼠耳廓肿胀和鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀有明显的抑制作用,说明主要含皂苷的正丁醇部分提取物有抗炎作用。2土牛膝化学成分的提取分离与结构鉴定取土牛膝干燥根及根茎20Kg粉碎,用70%乙醇回流提取,回收乙醇成悬浮液,悬浮液依次以乙酸乙酯和正丁醇充分萃取。乙酸乙酯和正丁醇萃取物通过经典柱层析法分离,得到7种单体化合物。利用NMR、MS等技术鉴定其结构为β-胡萝卜苷,齐墩果酸,β-蜕皮甾酮,25-S-牛膝甾酮,25-R-牛膝甾酮,齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,化合物7。其中β-胡萝卜苷、25-S-牛膝甾酮、25-R-牛膝甾酮、齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷为首次从土牛膝植物中分离得到。3土牛膝及含土牛膝的制剂喉咽清口服液的化学成分分析首次建立了土牛膝中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的RP-HPLC测定方法。首次建立了以齐墩果酸-28-0-β-D-吡喃葡萄糖苷为含量测定指标的喉咽清口服液RP-HPLC方法,为喉咽清口服液制剂的质量控制提供参考。