目的:本课题组前期报道心脏型脂肪酸结合蛋白(cardiac fatty acid binding protein,FABP3)可通过抑制小鼠心室肌细胞舒张期舒张过程中的钙再摄取(或钙回收)从而抑制心肌细胞收缩能力。但是,在现阶段FABP3抑制钙回收的详细机制尚不清楚。肌浆网钙离子泵(sarco/endoplasmic reticulum calcium ATPase,SERCA)是负责心脏舒张钙再摄取的主要蛋白质,已知SERCA的活性可以通过多种机制的调节。其中附属蛋白结合可能是主要机制。众所周知受磷蛋白PLB(phospholamban)可与SERCA结合,并且PKA(protein kinase A)介导的PLB磷酸化是导致PLB与SERCA解离并引起SERCA活化的主要机制。因此,本项目旨在进一步探索FABP3如何调节心肌细胞中SERCA的活性。方法:1.本实验使用饲养于SPF级环境中的健康C57BL/6小鼠,12-14周龄。2.免疫共沉淀,研究FABP3与PLB是否结合。3.通过钙成像技术研究小鼠左室心肌细胞钙瞬变的动力学变化。4.观察FABP3给药条件下心肌细胞钙瞬变变化。5.免疫荧光,分析FABP3与SERCA的共定位。6.免疫共沉淀检测心肌组织FABP3与Drd1的相互作用。7.统计学处理和相关分析,数据用MEAN±SE表示,采用SPSS 13.0软件进行统计学处理分析,检验以P<0.05为差异有显著性意义。结果:1.FABP3抑制小鼠心室肌细胞中钙的再摄取率;2.FABP3促进PLB和SERCA之间的结合;3.FABP3对PLB的PKA磷酸化没有显著影响,但显著改变PKA介导的Ry R2磷酸化;4.FABP3与SERCA共定位;5.FABP3可与PLB免疫沉淀;6.FABP3与Drd1相互作用。结论:1.FABP3对PLB的PKA磷酸化没有显著性影响。2.FABP3可以与PLB免疫沉淀,提示FABP3通过与PLB的结合促进SERCA与PLB之间的结合。