中国大鲵肿瘤坏死因子受体相关因子3鉴别与抗病毒免疫功能研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:arx2007
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肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor associated factor 3,TRAF3)是肿瘤坏死因子受体相关因子(TNF receptor associated factors,TRAFs)家族的重要成员,是连接上游受体信号与下游抗病毒信号通路的重要转导蛋白,在脊椎动物的抗病毒先天免疫过程中起着重要作用。先前的研究大多阐明了 TRAF3在哺乳动物,鸟类和鱼类中的功能,但对于两栖动物中TRAF3的分子特征和功能作用仍然是未知的。本研究首先从中国大鲵中鉴定并分析了两个TRAF3基因(AdTRAF3A和AdTRAF3B)的分子特征和功能作用。AdTRAF3A和AdTRAF3B的完整开放阅读框(Openreadingframe,ORF)分别为 1,698 bp 和 1,743 bp,分别编码 565 和 580个氨基酸。AdTRAF3A和AdTRAF3B推导的蛋白质序列均包含一个指环结构域,两个锌指结构域,一个Coiled coil结构域和一个MATH结构域。系统发育分析表明AdTRAF3s蛋白与其他脊椎动物的TRAF3蛋白聚在一起。基因表达分析表明AdTRAF3s在所检测的大鲵组织中均有分布,且呈现相似的分布模式。大鲵虹彩病毒(GSIV)和poly(I:C)刺激下,大鲵血液或脾脏中的AdTRAF3s的表达量均显著增加,但表现出不同的应答模式。用DNA病毒和RNA病毒类似物处理大鲵外周白细胞时,沉默AdTRAF3A/B可以显著抑制IFN信号通路相关基因的表达。此外,AdTRAF3A的过表达可能会诱导IFN-β启动子的激活,而AdTRAF3A的锌指结构域,Coiled coil和MATH结构域对于IFN-β启动子的激活至关重要。但是,AdTRAF3B的过表达显著抑制了 IFN-β启动子的活性,当去除指环结构域或MATH结构域时,其抑制作用得到增强。另外,AdTRAF3A可以显著诱导NF-κB的激活,这意味着AaTRAF3A可能在IFN和NF-κB信号传导途径中起着正向调控的作用。综上所述,我们的结果表明,两个TRAF3基因在中国大鲵的抗病毒先天免疫过程中起着不同的调节作用。
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