人诱导多能干细胞体外扩增生成红系集落并构建红系祖细胞株的研究

来源 :第三军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiaojiao82
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过与滋养层细胞共同培养的方式,添加诱导因子,诱导人诱导多能干细胞(hiPSCs)分化成为红系祖细胞,并构建稳定的红系祖细胞株。方法:1)在添加有诱导因子Flt-3、TPO、SCF、EPO、IL-3的培养体系中,与CF-1小鼠胚胎成纤维细胞共培养的条件下,诱导商品hiPSCs分化成为红系集落。2)传代诱导成功的红系集落构建稳定的红系祖细胞株,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,流式细胞仪检测诱导细胞表面标志物,并与CD34+细胞诱导分化的红系祖细胞进行比较。结果:1. hiPSCs诱导构建的红系祖细胞株呈集落样生长,外观上与原代并无差异。CD34+细胞组诱导分化生成的红系祖细胞生长缓慢,细胞多散在呈悬浮状态生长,集落少见。2.瑞氏染色观察计数,hiPSCs诱导构建的红系祖细胞株为(72.20±6.24)%,CD34+细胞组的红系祖细胞(35.00±6.02)%,两组间比较,差异非常显著(P<0.01)。3.CD71-PE、CD235a-FITC流式阳性结果,hiPSCs诱导构建的红系祖细胞株CD71和CD235a阳性率分别为(85.09±4.14)%和(5.87±0.37)%,与原代的(93.52±1.59)%和(3.02士0.75)%相比有差异(P<0.05);CD34+细胞组的红系祖细胞CD71和CD235a阳性率分别为(23.47±1.77)%和(0.58±0.07)%,与原代的(84.22±3.66)%和(1.02±0.08)%相比差异非常明显(P<0.01)。两组红系祖细胞间CD71和CD235a阳性率差异显著(P<0.05)。结论:1.采用与基质细胞共培养,添加适宜的诱导因子组合的方法,诱导hiPSCs分化成为红系集落,并成功建立红系祖细胞株。2.与CD34+细胞来源的红系祖细胞相比较,hiPSCs分化而来的红系祖细胞株在表面标志继承性和遗传性状稳定性方面明显优于CD34+来源的细胞。
其他文献
研究目的周围性面瘫为临床最常见的面肌麻痹,其中外伤性面瘫是周围性面瘫中常见的一种,约占周围性面瘫的1/3。治疗面瘫是耳鼻咽喉科医师重要的任务之一,临床上首先应确定损伤的部
摘 要:物理是高中阶段十分重要的科目,同时也是一个学习难度较高的科目,是大多数高中生高中学习阶段的一个“噩梦”。很多同学不止一次地抱怨:“物理学不会”“物理学不懂”,甚至还有一些同学对物理产生了厌恶的感情。造成这种现象的原因也有很多种,而其中的大部分问题在大多数情况下都可以站在学生的角度进行解答。本文就将站在一名高中生的角度思考如何能够学好物理,提高物理学习的有效性。  关键词:高中物理;物理学习
摘 要:相对而言,县域高中生理科基础较差,对于较为抽象的高中物理知识,容易产生畏难情绪,再加上传统“满堂灌”的教学形式,导致学生兴趣低下,学习效果不佳。县域高中物理教师应积极探究新课程标准倡导的合作学习方式,化解物理学习困境,激发物理课堂生命活力,提高物理课堂教学的有效性。  关键词:合作学习;县域高中;高中物理课堂  在新课程标准中指出:课堂教学应鼓励学生合作学习,促进学生相互交流、共同发展,促
摘 要:本文简述了利用义务教育初中化学教材中蕴含的德育内容,可对学生进行爱国主义教育、辩证唯物主义教育、环境保护教育、情感意志教育。通过这些德育教育,可以提高学生的思想道德素质。  关键词:义务教育;初中化学;德育教育;思想道德素质  教师的职责是教书育人。为祖国培养人、教育人、塑造人,是我们教师义不容辞的责任。因此我们教师在传授知识的同时,要不失时机地对学生进行德育教育,提高学生思想道德素质,从
本文从"人文"的视角,阐述室内环境艺术设计的内涵,提出适应人的生理特点与行为特征及其规律;关注人的心理特征,满足人的情感、价值意义从;关注与尊重主体的审美价值取向;注重
近年来,伴随着对高中历史课程标准的研究,提出了历史学科的五大核心素,经过多次修订,最终确立为唯物史观、时空观念、史料实证、历史解释、家国情怀.其中,唯物史观是核心理念
摘 要:将思维导图融入高中化学教学活动中,能够对化学知识进行系统的梳理,将其重点难点进行归纳总结,使学生能够更加深入地理解化学知识,有条理地掌握知识。本文阐述了思维导图在高中化学教学中的应用,并且针对教学过程中存在的问题,采用思维导图的方法来解决。期望对高中化学的教学和学习活动,起到参考作用。  关键词:高中化学教学;思维导图;应用研究  对比高中其他学科课程来说,化学学科的考试题型较为复杂,并且
摘 要:初中物理是一门实践性很强的学科,在物理教学实践中,教师应该改变传统灌输性的教学模式,结合初中学生的认知特点,积极开展合作探究,全面优化学生的动手实践能力。特别是在信息技术快速发展的今天,教师在物理合作探究的开展过程中,应该积极引入信息技术手段,实现信息技术与物理合作探究的有效结合,全面提升初中物理的整体教学质量。  关键词:信息技术;物理合作探究;教学模式;有效结合  在初中物理合作探究课