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山楂(拉丁学名,Crataegus pinnatifida)属双子叶植物纲蔷薇科植物,富含原花青素、黄酮等多种活性成分,可以有效清除体内自由基,减少氧化损伤,具有显著的抗氧化活性。本论文以黑腹果蝇(Drosophila Melanogaster)和秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为实验模式生物,对山楂提取物(Hawthorn Fruit Extract,HFE)的体内抗氧化活性进行了研究,以此评价HFE的抗氧化能力及调控衰老的作用,并对其作用的分子机制进行初步探讨,为深入探究HFE的抗氧化机制提供基础,为相关产品的开发应用提供一定的指导意义。本论文通过高效液相色谱法对HFE内的各项活性成分进行定性定量分析,并以不同浓度(黑腹果蝇0、0.5、1.5、4.5mg/ml;秀丽隐杆线虫0、25、50、100μg/ml)的HFE饲喂果蝇和线虫,研究其对模式生物寿命的影响、对急性应激耐受能力的影响、影响生物体内抗氧化酶活力的变化、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化、抗氧化相关基因mRNA表达量的变化等。研究发现饲喂HFE的果蝇和线虫在生存实验与急性实验中明显表现出寿命的延长。果蝇实验中,1.5、4.5mg/mlHFE组雄、雌性果蝇的平均寿命及最高寿命均显著延长(P<0.05),百草枯与双氧水急性实验中HFE组果蝇的活力与存活时间也显著提高,同时HFE对高脂氧化损伤果蝇也有较好的保护作用。酶活力测定结果显示,1.5、4.5mg/m1组雌、雄性果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等相关抗氧化酶活力显著增加(P<0.05),MDA的含量显著下降,其中雄蝇体内MDA含量分别下降48.3%与54.5%(P<0.01)。RT-PCR结果显示,饲喂山楂提取物的模式生物体内相关抗氧化基因SOD、CAT及Nrf2 mRNA的表达量显著提高,Mth mRNA表达量有效下降。线虫实验中,饲喂HFE后,秀丽线虫表现出比正常组更高的寿命,并且在热应激、紫外辐射应激、双氧水氧化应激、胡桃醌氧化应激及百草枯氧化应激实验中寿命有效延长,其中50、100μg/mlHFE组线虫的身体长度及繁殖能力明显下降(P<0.05),均有宜于寿命的延长。荧光显微镜观察发现HFE组线虫的脂褐素自发荧光明显减弱,并且与HFE浓度呈剂量依赖效应。DCFDA探针结果显示HFE组线虫的体内总活性氧自由基(ROS)显著减少,氧化损伤明显降低。50、100μg/ml组线虫体内SOD酶活力显著提高(P<0.05),其相关抗氧化基因mRNA的表达量均受到不同程度的影响。本论文研究结果显示,HFE能够显著影响实验模式生物体内内源性抗氧化基因mRNA的表达水平,增强抗氧化酶的活力,改善抗氧化能力,提高模式生物清除体内自由基的能力,有效延缓衰老。