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目的:探讨醒脑静注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤凋亡基因Bcl-2及自噬基因Beclin1表达的影响及其可能的保护机制。
方法:本实验采用线栓法制备大鼠右侧中动脉闭塞(MCAO)缺血再灌注模型，将40只大鼠随机均分成4组，假手术组（sham，仅分离血管但不进行其他操作）、模型组、醒脑静低剂量组0.5ml/次、醒脑静高剂量组2ml/次。栓线后2h拔出线，恢复大脑中动脉血液再灌注，即可与药物干预治疗。采用Zea-longa报道的评分法，观察术后24h时大鼠行为学症状评分;术后23h时采用世界先进的Siemems公司magnetionsymphohy3.0TMRI进行头颅扫描，观察大脑缺血情况及再灌注后大脑出血情况;术后24h取脑，冠状切片，进行TTC染色，对白色梗死组织进行称重，以梗塞组织重量占总脑重量的百分比作为脑梗塞范围;进行HE染色观察细胞形态结构;应用末端脱氧核糖酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法（terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatedbiotin-dUTPnickendlabeling，TUNEL）检测损伤侧脑细胞凋亡并计算阳性细胞数;采用过氧化酶标记的链霉卵白素(Streptavidin/Peroxidase，SP)法检测损伤侧脑组织细胞Bcl-2、Beclin1阳性细胞的表达;电镜下观察其损伤侧脑组织的形态学改变。
结果:与假手术组比较，模型组大鼠表现严重行为学障碍状况，TTC染色见白色梗死灶，MRI和电镜下脑组织出现明显的损伤改变，细胞凋亡增多（P＜0.05），Bcl-2降低，Beclin1增加;与假手术组比较，治疗组表现出与模型组类似的结果，但与模型组相比，能明显改善大鼠行为学障碍及脑组织损伤改变，减少细胞凋亡，Bcl-2增加(P＜0.05)，Beclin1降低;治疗组中，高剂量组大鼠的行为学障碍评分、MRI、HE染色、TTC染色、TUNEL检测、电镜、Bcl-2和Beclin1表达量，与低剂量组相比，均有显著差异（P＜0.01）。
结论:实验各组大鼠的行为学评分、MRI、TTC染色、髓染色、TUNEL检测、电镜和SP法检测均有明显差异，说明模型的成功建立，即大脑中动脉缺血2h再灌注24h可以诱导神经细胞凋亡;醒脑静注射液可以减少脑缺血再灌注的脑损伤程度和神经细胞的凋亡;醒脑静注射液减少脑缺血再灌注的神经细胞凋亡的机制可能是:通过增强Bcl-2/Beclin1相互作用，醒脑静可以提高Bcl-2，降低Beclin1。Bcl-2上调可以结合更多自噬相关蛋白Beclin1，形成稳定的复合体而抑制凋亡。