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目的: 1.在一定参数的电针刺激不同穴位组合情况下,分析功能性便秘大鼠模型中血清及胃肠组织中生长抑素(SS)的动态变化。 2.通过比较不同针刺组中指标生长抑素(SS)的变化,选择出治疗功能性便秘的最优穴位组合,从而运用于功能性便秘的临床治疗 方法: 1.实验动物:SPF级SD大鼠60只,平均体质量(200±10)g,雌雄各半。购于西安交通大学实验动物中心。将大鼠单只饲养于单笼中,笼下垫滤纸,相同的生存环境,适应性喂养1周,大鼠一般情况正常,开始进行实验。将实验动物随机分组。 2.功能性便秘造模方法:将 SD大鼠单只单笼关起,笼下垫滤纸,正常饲养一周后,每日采用0-4℃生理盐水给予3ml/只进行灌胃。每天1次,连续造模14天。为消除生物节律的影响,每天同一时间进行束缚应激。停止灌胃后,各组继续正常饲食、饮水,观察14天。造模和观察共用28天。 3.分组方法与标本采集:(按完全随机设计原则分组)60只大鼠适应性喂养7d后,随机分为6组:空白组一组,温水对照组1组、观察组4组,每组10只。对照组以22~26℃0.9%NaCI溶液灌胃;其余4组以0-4℃生理盐水给予3ml/只进行灌胃。(动物灌胃剂量按人的等效量换算)。 温水灌胃对照组大鼠于28d末,观察组各组大鼠分别于28d末,对相应组进行针灸治疗10天,每天一次,针灸治疗结束后采血及截取相应胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠组织,用于检测脑肠肽SS的水平。 4.电针对大鼠功能性便秘调节作用机制的研究 功能性便秘组大鼠:60只大鼠适应性喂养7d后,随机分为6组:空白组,温水对照组、模型组、单元取穴组(双侧天枢、大肠俞)、集元取穴组(双侧曲池、上巨虚)、单元加集元取穴组(单侧天枢、大肠俞、曲池、上巨虚),每组10只(上巨虚位于大鼠后肢足三里向下约5mm处,曲池在大鼠桡骨近端的关节外侧前方的凹陷中,大肠俞位于第4腰椎棘突下,旁开5mm,天枢穴位于脐中旁开5mm,以上各穴均直刺5mm)。采用韩式电针仪(LH202H型)治疗,选择疏密波,频率为疏波2Hz,密波15Hz,电流强度为1.5mA,以引起大鼠肢体轻微抖动为度,留针20分钟,温水灌胃组和模型对照组不做电针处理,1次/日,10次为一疗程,1个疗程后评定疗效。电针治疗10日后,处死,取标本,采集所需标本进行检测。 5.观察及检测方法 大鼠一般状态:大鼠精神状态、皮毛、食量、活动度,体质量增长率,粪便性状,首次黑便排出时间,大鼠24小时粪便粒数和质量,大鼠粪便含水量等。 6.实验技术及检测方法 采用ELISA法检测大鼠血清及组织中SS水平 结果:在一定参数的电针刺激不同穴位组合情况下,功能性便秘大鼠模型中血清及胃肠组织中生长抑素(SS)发生动态变化,通过比较不同针刺组中指标生长抑素(SS)的变化,集元组生长抑素(SS)含量降低最明显 结论: (1)明确电针不同穴位对功能性便秘大鼠中脑肠肽 SS调控作用的特异性穴位组。从分子水平阐明电针调节功能性便秘的作用机理。 (2)为电针防治功能性便秘提供实验依据。 (3)为防治功能性便秘的针灸穴位配伍优化方案的筛选提供依据。