目的:研究p16/Ki67细胞学双染在人群中筛查宫颈高级别上皮内病变的性能,并评估其在液基细胞学筛查为不明确意义的非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）、hrHPV阳性群体中及阴道镜检查宫颈转化区Ⅲ型的患者中筛查宫颈高级别病变的可行性和效果。方法:在青岛大学附属医院妇科进行的前瞻性横断面研究,历时30个月,包括1915名患者。全部患者均进行了p16/Ki67细胞学双染、hrHPV Cobas4800检测和液基细胞学检查。对867名宫颈上皮异常的患者行阴道镜检查、活检或锥切术、免疫化学染色,评估p16/Ki67细胞学双染在人群中诊断宫颈高级别病变的性能,并与液基细胞学（LCT）、hrHPV检测进行比较,同时评估了p16/Ki67细胞学双染在ASCUS/LSIL、hrHPV阳性及阴道镜检查宫颈转化区Ⅲ型的患者中筛查宫颈高级别病变的灵敏度、特异度、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）、ROC曲线下面积（AUC）值、阳性似然比（+LR）及阴性似然比（-LR）。结果:1.p16/Ki67细胞学双染的阳性率随着细胞学和组织学的级别升高而升高。与CIN2+的一致性分析,p16/ki67细胞学双染的一致率为92.4%,Kappa值=0.846,较LCT和hrHPV的一致性好。p16/Ki67细胞学双染AUC值为0.929（0.91-0.948）,明显高于LCT的0.748及hrHPV的0.575;其灵敏度为96.5%,明显高于LCT的85.9%,特异度为89.4%,明显高于hrHPV检测的18.2%及LCT的63.7%,同时PPV为87%、NPV为97.2%、+LR为9.08,均高于LCT、hrHPV,两两比较均有统计学差异。2.p16/Ki67细胞学双染分流ASCUS检测CIN2+的AUC值为0.883（0.836-0.93）,高于hrHPV的0.522和HPV16/18基因型的0.63;其灵敏度为95.1%,高于HPV16/18基因型49.5%,特异度为81.5%,明显高于hrHPV检测的7.3%;同时PPV 81%、NPV 95.3%及+LR 5.13最大,差异具有统计学意义。p16/Ki67细胞学双染分流LSIL检测CIN2+的AUC值最大0.926（0.852-0.999）,高于hrHPV的0.559和HPV16/18基因型的0.708。灵敏度为96.9%,高于HPV16/18基因型56.3%,其特异度为88.2%,明显高于hrHPV的11.8%,同时PPV为88.6%,+LR为8.23,均高于hrHPV的51.6%、1.13和HPV16/18基因型的78.3%、3.83,差异具有统计学意义。3.225例HPV16/18阳性患者分流中p16/Ki67细胞学双染的AUC值、灵敏度、特异度、PPV和NPV分别为0.897、97.4%、82%、84.7%,96.8%,而LCT分别为0.736、87.7%、59.5%、69%、82.5%。439例其他12hrHPV阳性患者分流中p16/Ki67细胞学双染AUC值、灵敏度、特异度、PPV和NPV分别为0.939、97.2%、90.6%、83.1%,98.5%,而LCT分别为0.729、85.2%、60.6%、50.8%、89.6%。两两相比,差异均具有统计学意义。4.在阴道镜检查宫颈转化区Ⅲ型时,p16/Ki67细胞学双染检测CIN2+的AUC值为0.947（0.914-0.981）,高于hrHPV的0.558和LCT的0.741;其灵敏度为98.2%,明显高于LCT的86%,有统计学意义。其特异度为91.2%,显著高于hrHPV的16.9%和LCT的62.2%,同时拥有高的PPV81.2%及+LR 11.2,与LCT及hrHPV相比具有统计学意义。结论:1.p16/Ki67细胞学双染诊断CIN2+的一致性好,阳性率随着病变程度的增加逐渐增加,与hrHPV相比特异度高,与LCT相比灵敏度增加,可有助于子宫颈癌筛查。2.p16/Ki67细胞学双染分流ASCUS、LSIL与hrHPV相比在未明显减低灵敏度的情况下,特异度、PPV和AUC显著增高,具有分流ASCUS和LSIL的临床价值。3.p16/Ki67细胞学双染分流HPV16/18和12hrHPV基因型阳性患者中,表现良好的灵敏度、特异度、PPV、NPV、AUC值,减少阴道镜转诊,具有分流HPV16/18和其他12hrHPV阳性患者的临床价值。4.在阴道镜检查宫颈转化区Ⅲ型的患者中p16/Ki67细胞学双染灵敏度高于LCT,特异度较LCT和hrHPV均明显提高,为一种有效的筛查方式。