糖尿病是一种以高血糖为特征的胰岛素缺乏或相对缺乏导致的内分泌代谢疾病，并发的多种慢性合并症是病人致残或致死的主要原因。已有的口服降糖药均不能完全有效的改善糖尿病的病理异常，因此，寻找预防和治疗糖尿病的有效药物已成为世界范围内的一个重大课题。二苯乙烯类化合物E2是我室从大黄根茎中提取纯化的一类结构全新的具有自主知识产权的降糖药物，作用机制不明。为此，我们开展了E2的降糖以及相关并发症的改善作用实验研究，系统的研究其可能的作用机制，同时对糖尿病发病机理进行了探索性研究。目的是评价E2的降糖作用，阐明其降糖作用机制，包括E2对多种糖尿病模型的降糖效果，对靶细胞的生物学效应和分子调控，为开发新型降糖药物提供理论基础；并在国内外首次进行鞘氨醇激酶(sphingosine kinase，SPK)在糖代谢调控中的作用研究，探讨其作为调控糖代谢新靶标的可能性，为糖尿病发病机制研究提供实验基础。本文首先采用5种不同类型的糖尿病实验动物模型系统研究了E2对糖尿病及其并发症的治疗效果，研究结果表明：E2能明显降低不同糖尿病动物的血糖血脂水平，显著改善葡萄糖耐量的异常，血清生化指标检测证实E2不能促进胰岛素分泌，病理形态学结果显示E2对胰岛细胞具有保护作用，血液动力学和电镜观察超微结构结果表明E2对受损的心脏、肾脏、肝脏和脾脏的结构具有修复和保护作用；E2能显著增加糖尿病大鼠肝脏和心肌组织的糖原合成；血流动力学结果表明，E2能有效裂解糖基化形成的终产物AGEs从而能显著提高大鼠心输出量，降低总外周阻力，提高全身动脉顺应性；Western Blot结果显示E2能明显提高肝脏胰岛素受体含量，活化肝脏和心肌组织Akt、GSK-3β信号通路。在上述药效学实验的基础上，我们对E2降糖降脂改善并发症的细胞和分子机理进行了较为系统的探索研究。首先对调控糖代谢的靶细胞进行了筛选，发现E2能明显的促进高糖状态下的肝L0-2细胞的葡萄糖消耗，而对肌母C2C12细胞作用不明显，提示E2作用的靶细胞可能是肝细胞。选用βTC3胰岛细胞观察E2是否具有促胰岛分泌作用，结果证实，E2不能促进胰岛细胞分泌胰岛素。其次我们对E2调控糖代谢的分子机理进行了探讨，研究结果表明：E2在体外可以激活Akt、GSK-3β激酶磷酸化，促进肝细胞的葡萄糖调控。同时我们也首次发现胰岛素和E2能明显增强SPK激酶活性，SPK和磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide 3-kinase,PI-3K)同属脂质激酶，而PI-3K激酶是调控糖代谢的一个关键分子，结合脂质激酶在糖代谢中的重要地位，我们大胆推测，SPK很有可能是糖代谢调控的另一个新的关键分子。为此，我们又对鞘氨醇激酶SPK在糖代谢调控中的作用进行了探索性研究，试图阐明SPK是否是除PI-3K外的另一个与糖代谢密切相关的分子。首先用腺病毒介导的SPK1基因转染肝L0-2细胞和C2C12肌母细胞，结果表明，SPK1基因转染可以直接刺激细胞的葡萄糖吸收，也能明显促进胰岛素刺激的细胞对糖的吸收，SPK阻断剂DMS抑制SPK1表达及其酶活性，能够导致细胞摄取葡萄糖的能力减弱，并且也使细胞在胰岛素刺激下的葡萄糖吸收显著地降低。其次用腺病毒介导的SPK1基因转染原发2型糖尿病KK-Ay小鼠，在整体动物水平观察并确定SPK对糖代谢的调控作用，研究结果发现，SPK1能够明显降低2型糖尿病KK-Ay小鼠的血糖；改善胰岛素抵抗，SPK1在肝组织、心肌组织、骨骼肌组织中都有较高的表达，这些结果提示SPK1是参与糖代谢调控的一个关键分子，有望成为糖尿病防治的新靶点。通过以上结果，我们可以得出：(1)E2能明显的降低糖尿病模型的血糖和血脂，显著改善心功能，逆转血管硬化，对肝脏、脾脏和肾脏损伤具有较为明显的保护作用，因此，E2是预防和治疗糖尿病及其相关并发症的一种新的行之有效的药物(2)E2的作用机制是：①不刺激胰岛细胞分泌胰岛素，对胰岛细胞具有保护作用；②增加肝脏胰岛素受体数目；③通过激活Akt、GSK-3β激酶磷酸化促进肝糖原和心肌糖原合成；④促进肝细胞的葡萄糖消耗；⑤通过裂解糖基化终产物AGEs改善血管硬化；⑥活化鞘氨醇激酶(sphingosine kinase，SPK)，提高对糖代谢的调控；(3)SPK可能是除PI-3K外的另一个与糖代谢密切相关的脂质激酶。