瞬时弹射式蒸汽爆破降解黄曲霉毒素B1的研究

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黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是迄今发现污染农产品毒性最强的一类生物毒素,对人类和动物具有极强的致突变、致癌和致畸性,其中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)的毒性最强,因此被用来作为AFT的评价指标。本研究利用蒸汽爆破技术,优化关键技术参数,高效降解玉米秸秆和花生饼中AFB1;利用超高效液相色谱三重四级杆质谱仪(UPLC-TOF-MS/MS)分析玉米秸秆中AFB1的降解产物,解析其降解途径;利用MTT试验评价玉米秸秆和花生饼中AFB1降解产物的生物学毒性,为实现农作物资源的无害化和高值化提供理论依据,为进一步推进我国饲料和食品安全奠定理论基础。主要的研究结果如下:(1)采用不同爆破条件降解玉米秸秆中AFB1,结果表明:在2.4 MPa压力下处理60 s,AFB1的降解率可达98.4%,但当处理时间达到140 s时,玉米秸秆中的AFB1被完全降解,降解率为100%,在此条件下,产生5种降解产物,其分子式分别为A(C17H8O6)、B(C17H14O6)、C(C16H8O5)、D(C17H14O7)、E(C17H16O9),解析两条降解途径,第一条是缩合加成降解途径,主要是水分子加成反应、乳糖和半缩醛水解、氧化反应,第二条是脱氢裂解降解途径,主要涉及脱氢反应和酯键羰基生成。对不同爆破条件下AFB1降解产物和降解途径进行比较,结果发现在同一保压时间下,随着爆破压力的增加,AFB1的降解产物增多,且出现新的降解途径,即AFB1经过芳香化形成降解产物A。而在相同的爆破压力下,随着保压时间的延长,AFB1降解更倾向于降解成降解产物B。基于MTT试验评价降解产物的生物毒性,在0.039μg/m L和0.156μg/m L药物浓度下,玉米秸秆经蒸汽爆破后补加AFB1的样品的细胞致死率远远大于加标玉米秸秆经蒸汽爆破的样品的细胞致死率,降解产物对细胞的致死率分别降低了79.65%和27.28%,表明经过蒸汽爆破后,降解产物的细胞毒性显著降低。(2)利用蒸汽爆破降解花生饼中AFB1,考虑花生饼的营养价值和能源的消耗,选择1.2 Mpa爆破压力,保压200 s作为最优爆破条件,此时AFB1的降解率为79.03%;利用氨水复合蒸汽爆破处理花生饼,结果显示在4%的氨水浓度复合1.2 Mpa爆破压力,200 s保压时间条件下处理花生饼后,AFB1的降解率最大可达91.48%,经检测此时花生饼中粗蛋白含量较处理前增加了10.67%,而其它营养成分差异不明显;基于MTT试验评价爆破处理前后花生饼的细胞毒性,结果表明2.5 g污染AFB1的花生饼会使5.79%的细胞死亡,而经蒸汽爆破处理之后的花生饼会促进细胞的生长,说明AFB1的降解产物是低毒或无毒的。
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