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应激是机体在遇到不良环境刺激下所产生的一系列神经-内分泌反应,可对机体的神经系统、免疫功能、内分泌系统、心血管系统等产生不同程度的损害。目前的研究多是通过建立单一形式的应激模型,来探究天然产物活性成分的抗应激作用,有关多个因素结合建立应激模型的研究不多;有关天然产物抗应激活性成分之间是否存在协同作用的研究也很少。因此,本研究以人参皂苷为研究对象,并选择四种不同结构的多酚,通过建立组合应激模型,探究人参皂苷与多酚类化合物之间存在的协同抗应激作用。 本论文以人参皂苷为研究对象,采用超声波辅助乙醇提取人参须中的皂苷组分,后采用静态吸附法对HP-20、AB-8、HPD300三种大孔吸附树脂的吸附率及解析率进行了比较,发现AB-8对人参皂苷粗提液中皂苷的吸附和解析率均较高;AB-8树脂纯化后获得人参皂苷的纯度为56.882%。超高压液相色谱-飞行时间质谱仪分析得出人参皂苷中含有12种活性单体。 采用邻苯三酚自氧化法和溴甲酚紫光度法进行了体外清除活性氧自由基的实验,发现人参皂苷可有效清除活性氧自由基,且与儿茶素、原花青素联合作用时其协同作用指数CI<1。体外抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性的作用结果表明:人参皂苷和儿茶素在浓度为56 mg/mL和1875μg/mL时,抑制率分别为88.16%,84.92%,组合物浓度为2000μg/mL时,抑制率即达到了79.53%,且联合用药时CI<1。表明人参皂苷和儿茶素可协同抑制AChE活性。 通过离体培养SD大鼠乳鼠海马神经元细胞,采用MTT法测定细胞存活率的活性,得出人参皂苷和儿茶素组合给药时其促细胞增殖率比单独使用人参皂苷和儿茶素,分别提高了8.8%和96.9%;氧化损伤下的海马细胞增殖率比单独使用时分别提高了14.1%,194.8%。 最后通过建立小鼠应激模型,研究人参皂苷与儿茶素协同抗应激作用。人参皂苷可抑制应激对小鼠产生的神经损伤,并通过以下途径发挥作用:改善应激导致小鼠产生的抑郁和焦虑状态;降低小鼠血清中糖皮质激素的水平;提高小鼠脑中单胺类神经递质的水平;调节海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)的表达;且人参皂苷与儿茶素联合给药时效果更好。