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半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit的干燥块茎。具有燥湿化痰,降逆止呕,消痞散结功能。主治痰多咳喘,痰饮眩悸,风痰眩晕,痰厥头痛,呕吐反胃,胸脘痞闷,梅核气症。
本论文主要通过对半夏种植资源的调查,以高效液相色谱法(HPLC)为主要分析手段,测定不同产地半夏药材中水溶性成分鸟苷和腺苷的含量,并结合指纹图谱研究以期建立半夏药材质量的综合评价方法,为环境因子与药材的质量相关性研究提供依据。实验的主要结果如下:
1.建立了半夏药材中鸟苷和腺苷的提取和含量测定方法。提取方法为:精密称取干燥至恒重的半夏药材(粉碎,过60目)1.0 g, 置50 ml锥形瓶中,精密加入30%MeOH 30 ml,称重,超声提取30 min,冷却后补至原重,滤过,滤液过0.45μm 微孔滤膜作为供试品溶液。色谱条件为:色谱柱: Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(15:85);检测波长:λ=260 nm(鸟苷), λ=254 nm(腺苷);柱温:25℃,流速:0.7 ml·min-1;理论塔板数以鸟苷峰计不低于2000。结果表明该方法精密度高、重现性良好,可作为半夏的含量测定手段。
2.采用建立的含量测定方法测定了贵州不同产地半夏药材中鸟苷和腺苷的含量,结果表明不同产地的样品指标性成分的含量差异显著。
3.建立了半夏药材的HPLC指纹图谱的研究方法,色谱条件为:乙腈-0.01%磷酸梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1 ml·min-1,柱温为30 ℃,进样量20 μl,洗脱时间为65 min。结果表明,该方法所得指纹图谱稳定性好、响应峰多、吸收强、特征明显,所测组分均达到基线分离,可作为半夏药材指纹图谱研究方法。
4.对不同产地的14批药材进行指纹图谱分析,通过相似性比较发现,赫章与财神地区的4批药材与对照指纹图谱及其它地区的样品相似性较差,再将其它10批具有代表性的药材进行分析,共标定了11个共有峰。将样品色谱图与对照品色谱图进行比较,可确定5号峰、6号峰分别为鸟苷和腺苷。由相似度评价结果可知,除河镇1地区和遵义地区半夏药材与对照指纹图谱的相似形分别为0.899和0.878以外,其于地区样品与对照指纹图谱的相似性都在0.9以上。