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急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的严重程度各异，一些病人发病轻、呈自限性，而其他病人病情重、死亡率高，很大程度上导致其严重性的原因还不清楚，多数学者支持用胰酶激活学说来解释。但现在普遍认为，在急性胰腺炎中，最早期的事件发生在腺泡细胞内并导致腺泡细胞的损害，随后炎细胞的聚集和炎症介质的产生，造成胰腺局部损伤和全身炎症反应综合征。大量证据表明，在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatids, SAP)的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)发生中，激活的白细胞及其释放的一系列的炎症介质，参与了胰腺局部的损害并逐渐放大至全身炎症反应。许多研究试图探索AP早期调节白细胞激活的细胞因子，期望能阻断SIRS的发生。近来有研究发现，趋化因子在AP的局部和远处并发症的发生中可能是重要的炎症介质，在调节胰腺炎严重程度和相关的肺损伤方面起重要作用。本实验运用大鼠轻重两种AP模型，研究与白细胞趋化和激活密切关联的两种趋化因子CINC和MCP-1／JE在胰腺中的表达，阐明趋化因子在AP早期发病机制中的作用。此外，很多的基础和临床研究发现中药提取物氧化苦参碱(oxymatrine, Oxy)具有抗炎、抗过敏、调节免疫及稳定细胞膜等作用，并能抑制TNF-α、IL-1和IL-6等细胞因子的产生，本实验运用氧化苦参碱治疗实验性SAP，观察其抗炎、调节免疫的作用，期望寻找到治疗SAP更为有效、价廉的药物。 1．轻重不同两种大鼠急性胰腺炎模型的制作 目的 采用不同浓度的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射，复制轻症和重症两种实验性大鼠AP模型。方法 64只大鼠随机分为假手术(SO)组、0.5％牛磺胆酸钠(0.5％ST)组和5％牛磺胆酸钠(5％ST)组，胆胰管逆行注射浓度分别为0.5％和5％的牛磺胆酸钠诱导AP，采用酶法检测血清淀粉酶、血糖、肌酐，化学比色法检测血清钙和速率法检测谷丙转氨酶，观察24h死亡率及胰腺组织病理学改变。结果 0.5％ST组和5％ST组24h死亡率分别为0和35％；与SO组相比，0.5％ST组血清淀粉酶升高(p＜0.01)，病理检查胰腺轻度肿胀，间质水肿，属轻症急性胰腺炎(MAP)；5％ST组血清淀粉酶、第二军医大学摘要硕士学位论文血糖、肌配及谷草转氨酶均显著升高印<0.05或p<0.01)，血清钙降低印<0.05或p<0.01)，病理检查胰腺组织有明显出血坏死，符合重症急性胰腺炎(s妙)。结论采用浓度为0.5%和5%的牛磺胆酸钠逆行大鼠胆胰管注射，可分别复制出理想的MAP和SAP模型，重复性好。2.趋化因子在急性腆腺炎早期的作用机制 目的探讨中性粒细胞趋化因子(C INC)和单核细胞趋化蛋白似CP一1/JE)在急性胰腺炎(AP)早期发病机制中的作用。方法54只大鼠随机分为假手术(s0)3h、6h、12h组、重症急性胰腺炎(sAP)3h、6h、12h组和轻症急性胰腺炎(MAp)3h、6h、12h组，分别以浓度为0.5%和5%的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠MAP和SAP模型，检测血清淀粉酶，观察胰腺组织病理学改变，分别采用逆转录一聚合酶链反应(RT一PCR)检测胰腺组织中C创C mRNA和MCP一1/J E mRNA的表达，采用免疫组织化学方法和蛋白质印迹检测胰腺组织中CINC及MCP一1/JE蛋白的表达。结果假手术组表达阴性，MAP各组胰腺腺泡细胞中有CINC蛋白的表达，SAP各组中则有强阳性表达，并均随胰腺炎病变的进展表达逐渐增强，同时可见其中浸润的白细胞亦着C创C阳性的棕黄色颗粒。随AP的病变程度的加重和时间的延长，胰腺组织中CINC及MCP一1/JE蛋白的表达均有显著升高印<0.05或p<0.01)，CINC mRNA、MCP一1/JEmRNA的表达明显上调的趋势印<0.05或p<0.01)。CINcm丑NA、McP一1/JE mRNA的表达都与胰腺组织病理学改变呈正相关。结论AP发生早期，胰腺腺泡细胞中有CINC和MCP一1/JE的表达，并随炎症轻重和时间延长在胰腺组织中的水平增加，CINC和MCP一1/JE是AP早期重要的炎症反应介质，在AP发病机制中起重要作用。3.氧化苦参碱治疗大鼠重症急性胰腺炎的实验研究 目的探讨中药氧化苦参碱(o xymatrine，Oxy)在急性胰腺炎(A卫)中的抗炎治疗作用。方法54只大鼠随机分为假手术(50)3h、6h、12h组、重症急性胰腺炎(S”)3h、6h、12h组和sAP给予oxy治疗3h、6h、12h组，以5%的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠sAP模型，oxy治疗组为S”大鼠在诱发前两天及诱发后lh腹腔注射Oxy治疗。酶法检测血清淀粉酶、ABC一ELISA法测血清TNF一、IL一6水平，观察胰腺组织湿干重比、髓过氧化物酶(Mpo)活性和病理学改变，检测胰腺组织中cINcmRNA及MCP一1泥mRNA的表达。结果与s”各组比，oxy治疗各组血清淀粉第二军医大学摘要硕士学位论文酶值下降印<0.01)、TNF一Q和IL一6水平有明显降低印<0.05或p<0.01)，胰腺组织CINC mRNA、MCP一1/JE mRNA的表达量下调印<0.05或p<0.01)，胰腺湿干重比降低印<0.05或p<0.01)、胰腺组织病理损伤减轻印<0.05或p<0.01)。结论伍y可抑制胰腺组织CINC mRNA及MCP一1/J E mRNA的表达，降低血清TNF一Q和IL一6的浓度，减轻胰腺病变程度，对实验性SAP有一定的治疗作用。综上所述，本研究的初步结论如下: 1.采用浓度为0.5%和5%的牛磺胆酸钠逆行大鼠?