迷迭香精油纳米乳制备及其抗氧化作用的研究

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迷迭香是原产于地中海国家的一种重要的香料植物,现在全世界广泛栽培。近年来,我国也有大面积的种植。二十世纪50年代以来,研究人员发现,迷迭香除了是一种重要的香料以外,其中的多种活性成分还具有很强的抗氧化性,且部分活性成分具有很大的药用价值。迷迭香精油是从迷迭香中提取出来的挥发性成分,其中萜类是最主要的成分,包括单萜、倍半萜等。基于目前迷迭香精油已广泛应用于医药、日用化工、食品等领域,迷迭香精油被认为在未来将具有更广泛的应用价值。本文首先摸索了制备迷迭香精油纳米乳和检测迷迭香精油纳米乳中精油含量的条件和方法,包括表面活性剂的筛选,伪三相图的绘制以及HPLC检测方法的确立。其次对制备出的迷迭香精油纳米乳进行质量评价,包括理化性质鉴定,粒径检测,稳定性考察等。最后对小鼠血浆、心、肝、脾、肺、肾进行各个生化指标抗氧化作用的研究,近而比较迷迭香精油和迷迭香精油纳米乳在抗氧化活性方面的差异。本文内容和结果如下:1确定形成纳米乳的配方:通过不同HLB值的表面活性剂和混合表面活性剂的筛选,确定了适合油相迷迭香精油的表面活性剂,即二种非离子表面活性剂Tween-80和Span-80的混合乳化剂,HLB值为12。同时通过伪三相图还确定了可以形成迷迭香精油纳米乳的区域:在乳化剂/迷迭香精油/水体系中最大进水量为89%,乳化剂与迷迭香精油在体系中的含量分别为1%和10%。2确定了迷迭香精油纳米乳中精油含量的HPLC测定方法:测定精油特征成分1,8-桉叶素,由特征成分含量计算精油的含量。色谱条件:BDS色谱柱(4.6mm×25cm,5μm);流动相:甲醇∶水(83∶17);流速1ml/min;检测波长266nm;进样量20μl;柱温35℃。对1,8-桉叶素标准品进行精密度实验,RSD=0.90%。对1,8-桉叶素标准品进行稳定性实验,RSD=0.28%。对1,8-桉叶素标准品进行重现性实验,RSD=0.33%。3迷迭香精油纳米乳的外观乳白色、透明、具有一定的流动性。通过亚甲基蓝和苏丹Ⅳ的扩散试验并结合相关参数的测定,确定制备的迷迭香精油纳米乳属于O/W型纳米乳。粘度为0.93s,pH值为7.68,电导率为24.3μs/cm。在透射电子显微镜下观察绝大多数呈圆球形,分散性良好,平均粒径为180nm左右,电位粒度分析仪测得的粒径为178nm左右。两者结果基本一致。4在该纳米乳的稳定性参数考察中,稳定性参数测定实验,加速实验,光加速实验结果显示该纳米乳含量和外观性状无明显变化。迷迭香精油纳米乳在水溶液中的缓释性能明显高于迷迭香精油在水溶液中的缓释性,此结果说明迷迭香精油被表面活性剂包裹后,提高了其有效存留时间。利用HPLC建立的方法,可以准确计算出迷迭香精油纳米乳中迷迭香精油的含量为25.89%。5通过检测阳性对照组与迷迭香精油组、迷迭香精油纳米乳组小鼠体内抗氧化酶SOD、CAT、GSH-PX的活性及脂质过氧化物MDA的含量来考察迷迭香精油与迷迭香精油纳米乳对小鼠的体内抗氧化活性。结果表明:迷迭香精油纳米乳可剂量依赖地提高小鼠心脏组织的CAT活性、SOD活性;可剂量依赖地提高小鼠肝组织的GSH-PX酶的活力;可剂量依赖地降低小鼠肝、肺组织的MDA含量。证实了迷迭香精油纳米乳具有提高小鼠体内的抗氧化酶活性,同时降低小鼠体内脂质过氧化物含量的作用并且效果优于迷迭香精油。
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