鲤(♀)×黄尾密鲴(♂)杂交后代的形成及生物学特性研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Tiger7
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远缘杂交是指在种间、属间甚至亲缘关系更远的物种间进行的杂交。远缘杂交可以导致后代的基因型与表现型均发生改变,是鱼类遗传育种中一种重要的方法。在本研究中,将具有较大生物学特性差异的鲤亚科的鲤(Cyprinus carpio,COC,2n=100)(♀)与鲴亚科的黄尾密鲴(Xenocypris Davidi Bleeker,YT,2n=48)(♂)进行远缘杂交,在其后代中,成功获得了同源二倍体类红鲫(NRCC),并对其外形特征、染色体数目、荧光原位杂交(FISH)、分子遗传等方面进行了深入研究。本研究的主要内容如下:1.对同源二倍体类红鲫的外形特征及繁殖特性进行了研究。同源二倍体类红鲫外形与自然界中的红鲫(Carassius carassius red var.,RCC,2n=100)相似;在繁殖特性方面,对10月龄同源二倍体类红鲫的性腺组织进行了石蜡切片观察,雌性同源二倍体类红鲫的卵巢结构发育正常,且存在大量III时相的卵母细胞;雄性同源二倍体类红鲫的精巢中存在大量正常的精细胞,表明同源二倍体类红鲫性腺发育正常。2.对同源二倍体类红鲫的染色体数目、DNA含量等生物学特性进行了研究。肾细胞制片技术与流式细胞仪测定法的结果显示:同源二倍体类红鲫的染色体数目为100,与母本鲤的染色体数目一致;且其DNA平均含量与母本鲤在统计学上无显著性差异(P>0.05),与父本黄尾密鲴在统计学上存在显著性差异(P<0.05)。综上所述,可以确定同源二倍体类红鲫为二倍体,2n=100。3.以鲫鱼特有的5S r DNA(340bp,GQ485556)为探针,对鲤、同源二倍体类红鲫、黄尾密鲴和红鲫的染色体分裂相进行荧光原位杂交(FISH)研究。研究结果显示:340 bp的探针在同源二倍体类红鲫的染色体中始终能稳定标记两个强信号点与两个弱信号点,与红鲫的荧光信号点一致,而在亲本鲤和黄尾密鲴的染色体上均未检测到任何信号点。4.对同源二倍体类红鲫的线粒体全基因组序列的结构变异情况进行分析,发现同源二倍体类红鲫的线粒体全基因组序列发生了较大地变异,同时在同源二倍体类红鲫的线粒体DNA中发现了父本黄尾密鲴碱基片段的插入、缺失等情况,结果表明同源二倍体类红鲫的线粒体基因组发生了较大比例的嵌合现象。5.对鲤、同源二倍体类红鲫和黄尾密鲴基因组DNA(5S r DNA、18S r DNA和Hox genes)的结构变异情况进行研究。结果发现同源二倍体类红鲫的18S r DNA基因序列结构和母本鲤更为相似,与父本黄尾密鲴具有较大差异,体现了同源二倍体类红鲫的母源性;同源二倍体类红鲫的5S r DNA和Hox基因序列结构存在较大地突变,来源于母本鲤和父本黄尾密鲴的遗传物质在同源二倍体类红鲫的这些基因序列结构中发生了重组,从基因组DNA水平体现其较大地变异性。本研究通过鲤和黄尾密鲴亚科间的远缘杂交,在杂交后代中成功获得了同源二倍体类红鲫并对其生物学特征进行了较系统的研究,为鱼类遗传育种研究提供了新的实验材料和重要的生物学数据,为鲤通过远缘杂交演变为鲫提供了重要的分子生物学证据。
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