【摘 要】
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[目 的]探究羟基枸橼酸(HCA)抑制高草酸诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用及其机制。[方法]本研究分对照组(Control)、草酸组(Oxalate)、HCA组(HCA+Oxalate)三个组:对照组(Control)为正常培养不做特殊处理的NRK-52E细胞;草酸组(Oxalate)为在培养基中加入600μmol/l草酸钾处理的NRK-52E细胞;HCA组(HCA+Oxalate)为在培养基中加
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[目 的]探究羟基枸橼酸(HCA)抑制高草酸诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用及其机制。[方法]本研究分对照组(Control)、草酸组(Oxalate)、HCA组(HCA+Oxalate)三个组:对照组(Control)为正常培养不做特殊处理的NRK-52E细胞;草酸组(Oxalate)为在培养基中加入600μmol/l草酸钾处理的NRK-52E细胞;HCA组(HCA+Oxalate)为在培养基中加入0.5μmol/1 HCA预处理1h,再加入600μmol/l草酸钾处理的NRK-52E细胞。用不同药物分别处理细胞后,CCK-8法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒检测细胞损伤程度,丙二醛(MDA)脂质氧化检测试剂盒检测细胞脂质过氧化损伤程度,western blot法检测细胞抗氧化应激相关蛋白(SOD1、SOD2、SOD3和CAT)表达。[结果]1.草酸和HCA对NRK-52E细胞活力的影响与对照组相比,草酸组细胞活性降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着草酸浓度升高和处理时间延长,细胞活力降低程度越大。与草酸组相比,HCA组细胞活力升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.草酸和HCA对NRK-52E细胞LHD释放率的影响草酸组LDH释放率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),HCA组LDH释放率低于草酸组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.草酸和HCA对NRK-52E细胞MDA含量的影响草酸组MDA含量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),HCA组MDA含量低于草酸组,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.草酸和HCA对NRK-52E细胞SOD和CAT表达的影响与对照组相比,草酸组表达更少的SOD1、SOD2和CAT,差异具有统计学意义(P<0.05),表达更多的SOD3,差异具有统计学意义(P<0.05)。与草酸组相比,HCA组表达更多的SOD1和CAT,差异具有统计学意义(P<0.05),表达更少的SOD3,差异具有统计学意义(P<0.05),SOD2的表达差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]草酸可降低NRK-52E细胞抗氧化应激相关的蛋白SOD1、SOD2、CAT的表达,加重细胞氧化应激,引起细胞氧化应激损伤,损伤程度与草酸浓度和作用时间相关。羟基枸橼酸可提高NRK-52E细胞抗氧化应激相关蛋白SOD1和CAT的表达,增强细胞抗氧化能力,抑制高草酸诱导的氧化应激损伤。
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