【摘 要】
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苦瓜和黄瓜枯萎病属于土传病害,也是蔬菜上的毁灭性病害,常年造成严重的生产损失。生物防治是作物病害安全治理的有效方法,链霉菌通过影响作物根际和土壤微生物群落之间的互作交流,或作为免疫反应诱导因子而发挥作用,对精准安全地防控苦瓜和黄瓜枯萎病有很大价值。通常,用于作物病害生防的链霉菌菌株都来自特定地区和植物,经过生物学特性和作用机制研究才能确定生防对象和功效。放线菌具有丰富的生物多样性,遗传和生理生化性
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苦瓜和黄瓜枯萎病属于土传病害,也是蔬菜上的毁灭性病害,常年造成严重的生产损失。生物防治是作物病害安全治理的有效方法,链霉菌通过影响作物根际和土壤微生物群落之间的互作交流,或作为免疫反应诱导因子而发挥作用,对精准安全地防控苦瓜和黄瓜枯萎病有很大价值。通常,用于作物病害生防的链霉菌菌株都来自特定地区和植物,经过生物学特性和作用机制研究才能确定生防对象和功效。放线菌具有丰富的生物多样性,遗传和生理生化性状受地理、作物来源和环境条件的制约,生防对象和功效也受这些因素影响。本研究从苦瓜枯萎病和黄瓜枯萎病高发区的植株根际土壤中分离放线菌,挖掘可以有效控制苦瓜枯萎病和黄瓜枯萎病的拮抗菌株,并提高拮抗菌株的发酵工艺。试验首先通过平板对峙试验和发酵滤液抑菌试验对从土壤中分离得到的放线菌菌株进行抑菌活性筛选;其次将拮抗菌株分别应用于盆栽试验中,探索拮抗菌株对苦瓜和黄瓜植株的各项生长指标的影响,以及对相关防御酶活性以及丙二醛和叶绿素含量的影响;再对此功能菌株进行多相分类学鉴定;最后分别从6个方面对拮抗菌株进行发酵条件筛选,确定拮抗菌株的最适发酵条件,以提升其对病原菌的抑制效果。试验结果如下:从苦瓜枯萎病病土中分离得到共计97株放线菌,从黄瓜枯萎病病土中分离得到共计68株放线菌。通过平板对峙试验和发酵滤液抑制试验,确定菌株GX-117对苦瓜枯萎病病原菌的抑菌活性最强,菌株GX-8对黄瓜枯萎病病原菌的抑菌活性最强;菌株GX-117与GX-8在高氏一号液体培养基上生长良好,均在第3 d时进入对数生长期,在第4 d时进入稳定期;并与实验室所保存的另外13株病原菌进行平板对峙试验,菌株GX-117对其中10株病原菌的抑菌效果在50%以上,菌株GX-8对其中8株病原菌的抑菌效果在50%以上。经过多相分类学鉴定,菌株GX-117和GX-8均为链霉菌属的成员。盆栽促生试验结果表明,菌株GX-117和GX-8分别对苦瓜和黄瓜幼苗具有不同程度的促生效果。菌株GX-117处理的苦瓜幼苗与CK相比,株高增加了20.76%,茎粗增加了16.88%,鲜重增加了82.93%,干重是CK的1.20倍。经菌株GX-8处理的黄瓜幼苗与CK相比,株高增加了60%,茎粗增加了12%;鲜重增加了54.05%,干重增加了20.59%。与CK相比,经菌株GX-117处理的苦瓜枯萎病苗期发病率降低了54.04%,防治效果为57.92%;经菌株GX-8处理的黄瓜枯萎病苗期发病率降低了42.83%,防治效果为43.01%。说明拮抗菌株GX-117和GX-8分别对苦瓜枯萎病和黄瓜枯萎病有一定的防病效果。菌株GX-117处理的苦瓜幼苗和GX-8处理黄瓜幼苗的各防御酶活性,除防治前期外,在整个取样周期内都显著高于CK;MDA含量累计均显著低于CK;叶绿素含量也均显著高于CK,表明拮抗菌株GX-117和GX-8具有一定抗病能力。分别从培养基、起始pH值、温度、转速、接种量和发酵时间6个方面对菌株GX-117和GX-8进行最适发酵条件筛选,试验结果表明,菌株GX-117的发酵最适条件为:大豆粉培养基、起始pH值为8.0、28℃、180 rpm/min、2 ml和4 d;菌株GX-8的发酵最适条件为:马铃薯葡萄糖培养基、起始pH值为7.0、28℃、200 rpm/min、1 ml和5 d。菌株GX-117和GX-8较发酵条件筛选前,对病原菌的抑菌效果分别提高了29.42%和37.96%。
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