脐带间充质干细胞联合强力霉素对肺纤维化小鼠早期干预研究

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背景肺纤维化是一组慢性的进行性肺间质疾病,病理改变主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化。肺纤维化发病机制尚不明确,预后不良,患者被确诊后,平均生存期为2-3年,5年生存率仅为30%。近年肺纤维化发病率不断上升,严重危害人类身心健康,而临床治疗中缺乏理想的治疗方法,因此有必要探究新的治疗手段改善这一困境。目的研究脐带间充质干细胞(UC-MSCs)联合强力霉素对肺纤维化小鼠的早期治疗效果及其作用机制。方法采用组织块培养法培养UC-MSCs,待细胞传至第3代后流式细胞仪检测细胞表型;选择健康成年清洁级雌性8周龄C57BL/6小鼠40只,采取随机数表法将其分为5组(n=8):对照组(A组)、模型组(B组)、强力霉素组(C组)、干细胞组(D组)、联合组(E组)。A组手术显微镜下气管内注入生理盐水,48 h后尾静脉注射生理盐水。B组手术显微镜下气管内注入博来霉素48 h后尾静脉注射生理盐水。C组手术显微镜下气管内注入博来霉素,48 h后腹腔注射强力霉素,后每隔48h腹腔注射1次强力霉素,共注射4次强力霉素。D组气管内注入博来霉素,48 h后尾静脉注射UC-MSCs。E组气管内注射博来霉素后48 h后尾静脉注射UC-MSCs,同时腹腔注射强力霉素,后每隔48h腹腔注射1次强力霉素,共注射4次强力霉素。于造模第28天,取所有小鼠右侧肺组织做石蜡切片进行HE、Masson染色,免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1表达含量。取左侧肺组织做肺组织裂解液测定羟脯氨酸含量。结论(1)肺组织肺泡炎评分及肺纤维化评分:A组<E组<D组<C组<B组(P<0.05)。(2)MMP-9表达评分:A组<E组<D组=C组<B组;TIMP-1表达含量评分:B组=C组<A组<D组=E组(P<0.05)。(3)羟脯氨酸含量:A组<E组<D组<C组<B组(P<0.05)。结果早期应用UC-MSCs联合强力霉素能够显著减轻小鼠肺纤维化程度,其机制可能与UC-MSCs能提高TIMP-1表达,联合强力霉素能够加强抑制MMP-9表达有关。
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