【摘 要】
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黄瓜(Cucumis sativus L.)是我国重要的蔬莱作物。2018年,我国黄瓜的栽培面积为1900万亩,年产量约6000万吨,占比超过世界的60%。单性结实指子房不经过授粉受精或其他刺激而发育成果实的现象,是设施黄瓜育种和栽培特别重要的农艺性状之一。露地阴雨天或设施低温、弱光,少虫媒的条件下,单性结实能力弱的品系坐果率下降、畸形果率上升,会直接导致产量和品质下降。而具有强单性结实能力的品种
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黄瓜(Cucumis sativus L.)是我国重要的蔬莱作物。2018年,我国黄瓜的栽培面积为1900万亩,年产量约6000万吨,占比超过世界的60%。单性结实指子房不经过授粉受精或其他刺激而发育成果实的现象,是设施黄瓜育种和栽培特别重要的农艺性状之一。露地阴雨天或设施低温、弱光,少虫媒的条件下,单性结实能力弱的品系坐果率下降、畸形果率上升,会直接导致产量和品质下降。而具有强单性结实能力的品种则可以在不良环境下成功坐果,并且其果实未授粉受精,具有无种子,果肉厚,心腔小的特点,易获得较高的品质、产量和经济效益。因此,强单性结实一直是黄瓜育种的重要目标,但是对黄瓜内部基因如何调控单性结实发生却知之甚少。本论文以单性结实能力强的BY为供体亲本,单性结实性弱的ZK为受体亲本,经过杂交、回交、自交、单性结实分子标记辅助选择、开花结果期单性结实性鉴定,获得了以ZK为遗传背景,含有BY导入片段的强单性结实染色体片段代换系(CSSL)。对CSSL和ZK未授粉果实进行转录组测序,获得单性结实相关差异表达基因,进而结合功能注释及qRT-PCR验证候选基因表达水平,鉴定单性结实候选基因。主要研究结果如下:1.构建CSSL的过程中各世代群体内单株单性结实率均为连续分布,说明该性状符合数量遗传特征;通过表型观察和数据统计,CSSL高代表型逐逐渐趋向于ZK。结合表型和单性结实率统计发现:BC2F1单性结实率为22%,BC3F1单性结实率为53%,BC4F1单性结实率为82.6%,BC4F2单性结实率为90.7%,因此,BY中带有强单性结实能力的染色体片段已成功插入到ZK基因组。2.本研究选取平均分布在7条染色体上的70对SSR引物,其中有36对SSR引物在亲本ZK和BY间具有多态性。利用36对引物对CSSL和ZK进行背景分析,结果表明,只有2对引物的条带与BY相同,其余则与ZK条带相同。因此,推测CSSL的遗传背景已逐渐和ZK相同,即CSSL的遗传背景已基本趋向纯合。3.对CSSL和ZK花后1天未授粉果实进行转录组分析,获得在CSSL和ZK中差异表达的基因2078个,其中1021个基因在CSSL中上调,1057个基因下调。由前述可知,ZK和CSSL仅在单性结实能力上呈现差异,其他遗传背景几乎相同,据此推测这些差异基因可能与单性结实性相关。结合基因功能注释、GO功能分析和KEGG功能分析,11个植物激素信号转导相关基因和2个糖类物质调控运输相关基因可能与单性结实密切相关。其中,乙烯和脱落酸相关5个基因在CSSL果实中下调表达,而与生长素和细胞分裂素信号转导途径相关的基因5个上调表达。初步获得了激素调控单性结实发生的分子证据。4.进一步通过qRT-PCR对上述基因表达模式进行分析,发现乙烯信号转导途径相关基因(CsaV33G012170;CsaV32G012870;CsaV33G046430)和脱落酸信号转导途径相关基因(CsaV37G025250;CsaV35G000620)在CSSL中的表达量低于ZK,而生长素信号途径相关基因(CsaV37G027610;CsaV33G012650;CsaV33G046370)的表达量低于ZK,这表明CSSL中生长素信号途径的增强表达、乙烯信号转导途径和脱落酸信号转导途径的抑制表达与黄瓜单性结实关系密切。
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