论文部分内容阅读
甲砜霉素(Thiamphenicol,TAP)是氯霉素类广谱抗菌药,它的甲基磺酰基取代了氯霉素的硝基,因而毒性降低,其抗菌作用比氯毒素强2.5-5倍。但由于其味苦,溶解度小,临床常用剂型仅有粉剂、片剂和胶囊剂,影响了其使用范围和临床应用效果。羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)一种具有广阔发展前景的优良药用辅料,不仅水溶度高(750g/L),且对热稳定,无肾毒性,肌肉注射几乎无刺激。难溶性药物被HP-β-CD包合后,能增加药物的溶解度和溶出度,提高药物生物利用度和稳定性。本课题旨在研究HP-β-CD对TAP的包合增溶作用机制,建立甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物(TAP-HP-β-CD)制备和鉴定方法,考察包合物的体外抗菌活性,探讨包合物体内药动学特性,为TAP新剂型开发与利用提供科学依据。其主要内容与结果如下:采用相溶解度法考察TAP与HP-β-CD在水溶液中包合增溶作用及包合过程中的热力学参数变化。结果表明:在一定温度下,TAP的溶解度均随HP-β-CD溶液浓度的增加而呈线性增加,相溶解度图为AL型,说明主客分子包合摩尔比为1:1;包合过程中吉布斯自由能减小(△G)、焓变(△H)和熵变(△S)均为负值,说明TAP与HP-β-CD在水溶液中的包合过程可自发进行。采用溶液搅拌法制备TAP-HP-β-CD包合物;用X射线衍射(XRD)、差示扫描量热法(DSC)和红外吸收光谱分析法(IR)对包合物进行鉴定;采用高效液相色谱法测定其溶出度和溶解度。各种方法表征结果表明:包合物已经形成,形成包合物后,TAP的溶解度和溶出速率均显著提高。采用氯化三苯基四氮唑(TTC)比色法研究TAP-HP-β-CD包合物的体外抗菌活性。配制一系列不同浓度的TAP原料药溶液和相应浓度的包合物溶液,以O78大肠杆菌为试验菌株,氯化三苯基四氮唑(TTC)作为细菌是否存活的显色剂,测定其最小抑菌浓度。结果表明:在体外试验条件下,TAP包合物的最小抑菌浓度与其原料药是相同,体外抗菌活性未受影响。为研究TAP-HP-β-CD包合物在鸡体内药代动力学特性时,将十只三黄鸡分成两组,分别灌服甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物和甲砜霉素粉后,在给定时间点采血,取其血浆加入内标氟甲砜霉素,以乙腈提取溶剂,用RP-HPLC内标法检测其不同时间的血药浓度。色谱柱为Shim-pack CLC-ODS(150mm×6mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0 ml·min-1,柱温为40℃,检测波长为225nm。TAP在0.25～32.00 mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1 mg·L-1;高、中、低3个浓度水平的日内,日间精密度RSD(n=5)均小于6.1%,提取回收率大于98%,方法回收率99.20%～100.25%,符合生物样品分析要求。最后,应用3p87软件拟合药时浓度,求算药物代谢动力学参数。结果表明:TAP包合物血药浓度达峰时间短,TAP包合物的相对生物利用度高。综上,HP-β-CD能显著提高TAP溶解度和生物利用度,通过适当的工艺有望将TAP-HP-β-CD制成可溶性粉、注射剂、软膏剂等新剂型。