【摘 要】
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目的拟通过完全随机对照研究,在评价针刺申脉、照海穴对慢性失眠患者临床疗效的基础上,试图探索申脉配照海穴治疗慢性失眠是否基于阴阳跷脉。为进一步探索针刺调节睡眠觉醒障碍的中枢机制,在证实针刺效应的基础上,观察针刺申脉、照海穴对失眠大鼠中枢c-fos蛋白表达的影响。方法临床试验:150例慢性失眠患者以1:1:1:1:1的比例随机分配至对照组、申脉配照海组、申脉配筑宾组、金门配照海组、金门配筑宾组。对照组
【基金项目】
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18401971000针刺阴阳跷脉治疗昼夜节律性睡眠障碍的临床疗效评价研究；
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目的拟通过完全随机对照研究,在评价针刺申脉、照海穴对慢性失眠患者临床疗效的基础上,试图探索申脉配照海穴治疗慢性失眠是否基于阴阳跷脉。为进一步探索针刺调节睡眠觉醒障碍的中枢机制,在证实针刺效应的基础上,观察针刺申脉、照海穴对失眠大鼠中枢c-fos蛋白表达的影响。方法临床试验:150例慢性失眠患者以1:1:1:1:1的比例随机分配至对照组、申脉配照海组、申脉配筑宾组、金门配照海组、金门配筑宾组。对照组采用假穴浅刺的方法,其余4组均采用双侧平补平泻的方法,每位受试者每周治疗3次,共治疗10次。采用失眠严重程度量表（Insomnia Severity Index,ISI）作为主要指标,评价受试者睡眠情况,次要指标包括匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI）、疲劳量表-14（Fatigue Scale-14,FS-14）、贝克焦虑量表（Beck Anxiety Inventory,BAI）、贝克抑郁量表（Beck Depression inventory-I amended,BDI-IA）。动物实验:选择慢性坐骨神经结扎（chronic constrict injury,CCI）作为长期失眠大鼠模型,将SD大鼠随机分为假手术组（n=5）和模型组（n=16）,观察其在造模后7d和15d痛阈的变化,以及造模后8d和16d睡眠觉醒的变化;在模型鉴定成功的基础上,将SD大鼠随机分为模型组（n=5）,针刺组（n=6）和对照组（n=5）,针刺组选择双侧申脉穴（B62）、照海穴（K6）,每天8:00行针刺干预20分钟,连续7天,观察针刺对痛阈及睡眠觉醒量的影响。将SD大鼠随机分为空白组（n=5）、模型组（n=5）、针刺组（n=5）和对照组（n=5）,在第7次针刺干预结束90min时灌注取脑,观察脑区核团c-fos蛋白表达的情况。结果临床试验:本试验共收集病例150例,脱落21例,脱落率14%,最终收集有效病例129例。五组受试者的性别构成、年龄、身体质量指数（Body Mass Index,BMI）、是否服用药物比较,差异均无统计学意义,五组受试者ISI、PSQI、FS-14、BAI、BDI-IA量表基线评分组间均衡。治疗后,申脉配照海组ISI总分下降约9.24分,与其他各组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。部分次要指标在治疗前后有明显改善,但组间差异均无统计学意义。动物实验:造模后8d及造模后16d,模型组主观黑夜12h Light的Wake累积量较假手术组有显著增加,NREM睡眠累积量较假手术组有显著下降,差异均有统计学意义,证明该模型制作成功。在此模型基础上,针刺干预7天后（即造模后16d）,针刺组主观黑夜12h Light的Wake累积量较对照组与模型组相比显著减少（P=0.026,P=0.024）,NREM睡眠累积量较对照组与模型组相比明显增加（P=0.016,P=0.031）,针刺组与假手术组相比,无论是Wake累积量还是NREM睡眠累积量,组间差异均无统计学意义（P=0.902,P=0.602）;免疫组化结果显示,相比于空白组,经CCI造模后的大鼠其中央杏仁核（central amygdala,Ce A）c-fos蛋白表达明显增加;干预后,针刺组相比于对照组、模型组、空白组,其蓝斑（locus coeruleus,LC）、中缝背核（dorsal raphe nucleus,DRN）、膝状体间小叶（intergeniculate leaflet,IGL）、橄榄叶前核（olivary pretectal nucleus,OPN）、外侧僵核（lateral habenular nucleus,LHb）区域的c-fos蛋白表达明显增多。结论1.基于不同穴位配伍及申脉配照海组的临床疗效,从“经脉所过,主治所及”的理论出发,部分证实了申脉、照海穴发挥治疗慢性失眠的作用是基于阴阳跷脉的循行有别于膀胱经与肾经。2.成功制作了疼痛引发的长期失眠大鼠模型,并在该模型上初步证实了针刺申脉、照海穴可有效调节失眠大鼠睡眠觉醒状态。3.通过进一步动物实验发现,针刺申脉、照海穴影响了LC、DRN、IGL、OPN、LHb区域神经元活性,这些核团可能是针刺调节睡眠觉醒障碍的关键。
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