低丰度蛋白质翻译后修饰的分析新方法

来源 :第21届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong583
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在组学层次研究蛋白质翻译后修饰可以在全局、系统的层面理解翻译后修饰调控生物过程的规律.尽管蛋白质组学技术在揭示蛋白质磷酸化、N-糖基化、乙酰化等高丰度翻译后修饰方面已经取得了很好的效果,但是对一些低丰度的翻译后修饰目前还缺少有效的分析方法.蛋白质组学方法分析翻译后修饰涉及修饰蛋白质/肽段的富集、分离、质谱检测及谱图解析等多个环节.低丰度翻译后修饰分析困难往往是由于多个环节缺少方法造成的.针对常规的基于抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集策略灵敏度低、重复性差的问题,首次将从SH2结构域蛋白质突变而来的SH2超亲体应用于复杂样品中酪氨酸磷酸化肽段的富集[1],发现该SH2超亲体对酪氨酸磷酸化肽段的富集能力优于常见的多种商品化酪氨酸磷酸化抗体。将该方法应用于9个细胞系样品中酪氨酸磷酸化蛋白质组分析,共鉴定到了10,030个高可信的酪氨酸磷酸化位点,其中36%的位点为首次鉴定,使酪氨酸磷酸化蛋白质组学的研究达到了一个前所未有的深度和广度。
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